Efecto de las secreciones oviductales y uterinas sobre el desarrollo in vitro de embriones clones de Ovis aries

Introducción: La transferencia nuclear de células somáticas (TNCS) es una biotecnología con aplicación en diferentes áreas tales, como la replicación de animales de interés zootécnico, especies silvestres amenazadas y animales transgénicos. No obstante, la TNCS no ha tenido la aplicación práctica co...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: JOSE ROBERTO VAZQUEZ AVENDAÑO
Tipo de recurso: tesis doctoral
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2024
País:México
Institución:Universidad Autónoma Metropolitana
Repositorio:Repositorio Institucional de la UAM Iztapalapa
Idioma:español
OAI Identifier:oai:bindani.izt.uam.mx:6t053g52q
Acceso en línea:https://doi.org/10.24275/uami.6t053g52q
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:info:eu-repo/classification/LEM/Clonación -- Ovejas
info:eu-repo/classification/LEM/Cloning -- Sheep
info:eu-repo/classification/LEM/In vitro
info:eu-repo/classification/cti/3
Descripción
Sumario:Introducción: La transferencia nuclear de células somáticas (TNCS) es una biotecnología con aplicación en diferentes áreas tales, como la replicación de animales de interés zootécnico, especies silvestres amenazadas y animales transgénicos. No obstante, la TNCS no ha tenido la aplicación práctica como otras biotecnologías reproductivas, debido a factores intrínsecos de la propia técnica, tales como resistencia a la reprogramación de la célula somática, pobre potencial de reprogramación de los ovocitos, traumatismo por manipulación y condiciones subóptimas del cultivo embrionario in vitro. Por otra parte, se ha reportado que la adición de fluido oviductal (FO) y uterino (FU) en el medio de cultivo in vitro de embriones generados por FIV en diferentes especies domésticas, tiene un efecto positivo en el desarrollo y la calidad embrionaria; debido a que el FO y el FU contienen una amplia variedad de proteínas que cumplen diferentes funciones durante el desarrollo embrionario y de las cuales carecen los medios de desarrollo embrionario in vitro. El objetivo del presente estudio fue evaluar el volumen, la osmolaridad, la concentración y el patrón de distribución de las proteínas del FO y FU, e identificar las proteínas OVGP1, HSP70 y Ezrin que son importantes para la fisiología reproductiva. Una vez que se evaluaron dichas propiedades, se analizó el efecto del FO y FU en el desarrollo de embriones clones y partenogenéticos de Ovis aries, así como en el balance de especies reactivas de oxígeno (ERO) y glutatión (GSH). Resultados: Se obtuvo en promedio de 3.2±1.5 µL de FO y 17±0.5 µL de FU por aparato reproductor; la osmolaridad fue de 343 ± 20.8 mOsm kg-1 y 280 ± 96.2 mOsm kg-1 y la concentración de proteínas fue de 71.9 ± 23.8 g L-1 y 21.8 ± 1.1 g L-1 , respectivamente. En el patrón de distribución de proteínas se observaron 20 bandas en FO y 14 bandas en FU. De ellos, 14 y 8 fueron específicos de FO y FU y 6 comunes a ambas. El espectro de pesos moleculares de las proteínas fue de 24 a 324 y de 29 a 353 kDa para FO y FU. Se identificó la presencia de las proteínas OVPG1, HSP70 y Ezrin en ambos fluidos, encontrándose en mayor cantidad en el FO. No se observó efecto en el desarrollo de embriones partenogenéticos y clones con 0.5% de FO y FU. Sin embargo, al 1 y 2% de FO y FU, se observó un efecto negativo en las primeras divisiones en los embriones partenogenéticos y en la etapa de blastocisto para los embriones clones. Se observó una disminución de los niveles intracelulares de ERO y GSH en los blastocistos partenogenéticos tratados con 1.0% de FO y FU, mientras que no se observó efecto alguno en los embriones clones. Sin embargo, los embriones clones presentaron mayor concentración de GSH que los embriones partenogenéticos. Conclusiones: El volumen recuperado de FU fue 5 veces mayor que el de FO. Tanto la osmolaridad como la concentración de proteínas fueron mayores en FO que en FU (1.2 y 3 veces mayores). El patrón de distribución de proteínas entre FO y FU fue diferente, siendo más complejo en FU. Las proteínas OVGP1, HSP70 y Ezrin fueron identificadas en el FO y FU, encontrándose en mayor cantidad en el FO. No se observó efecto de los FO y FU sobre el desarrollo embrionario y el balance redox en los embriones clones de ovino generados por clonación manual.

Similares en LA Referencia