Ensayos de obtención de fragmentos vNAR para la detección de Coccidioides spp.
La fiebre del Valle de San Joaquín o Coccidioidomicosis (CM) es una enfermedad pulmonar causada por el hongo Coccidioides spp. La perturbación del suelo por humanos, animales o condiciones climáticas ocasiona la dispersión de esporas de Coccidioides en el aire, pudiendo ser inhaladas por personas su...
| Author: | |
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| Format: | master thesis |
| Status: | Published version |
| Publication Date: | 2018 |
| Country: | México |
| Institution: | Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada |
| Repository: | Repositorio Institucional CICESE |
| Language: | Spanish |
| OAI Identifier: | oai:cicese.repositorioinstitucional.mx:1007/2540 |
| Online Access: | http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/2540 |
| Access Level: | Open access |
| Keyword: | info:eu-repo/classification/Autor/Coccidioides spp., biblioteca vNAR, coccidioidina, IDTP, ELISA info:eu-repo/classification/Autor/vNAR library, coccidioidin info:eu-repo/classification/cti/2 info:eu-repo/classification/cti/24 info:eu-repo/classification/cti/2414 info:eu-repo/classification/cti/241406 |
| Summary: | La fiebre del Valle de San Joaquín o Coccidioidomicosis (CM) es una enfermedad pulmonar causada por el hongo Coccidioides spp. La perturbación del suelo por humanos, animales o condiciones climáticas ocasiona la dispersión de esporas de Coccidioides en el aire, pudiendo ser inhaladas por personas susceptibles. Las esporas alojadas en un huésped forman esférulas, que una vez maduras liberan endosporas capaces de diseminar la enfermedad a otros órganos por la formación de nuevas esférulas. Debido al riesgo que representa esta enfermedad diversos autores han estudiado la distribución del hongo, y evaluado su incidencia con base a variables climatológicas como las temporadas de lluvias seguidas de periodos secos, la temperatura y las tormentas de arena. Además, se han realizado muestreos de animales que actúan como reservorios del agente etiológico. También se han analizado muestras de suelo por medio de métodos microbiológicos y moleculares. Los métodos actuales tienen limitantes ya que son influenciados por la información disponible en bases de datos epidemiológicos y genéticos; requieren altas medidas de bioseguridad para evitar contagios accidentales; requieren un gran esfuerzo de muestreo debido a la distribución aleatoria del hongo y/o implican costos altos de reactivos y equipos especializados. En este trabajo se propuso obtener fragmentos recombinantes de anticuerpos de tiburón (vNAR) afines a Coccidioides spp., los cuales permitan el desarrollo de un método de detección reproducible y de bajo costo para aplicarlo en zonas de riesgo. Este método facilitaría la detección directa del hongo sin requerir aislamientos del hongo o extracciones de ADN. Para la selección de anticuerpos afines a Coccidioides spp. se utilizaron dos antígenos: IDTP (IMMY©) y coccidioidina (InDRE). Se realizó una bioselección de fragmentos vNAR a partir de una biblioteca no inmune de fagos recombinados. Para la bioselección se utilizaron los dos antígenos no patogénicos obtenidos a partir del hongo, y para comprobar su eficiencia se realizaron pruebas de expresión, reconocimiento y especificidad por los antígenos. A partir de estos análisis se encontró un fragmento vNAR capaz de reconocer al antígeno IDTP, el cual podría ser utilizado para el desarrollo de un método de inmunodetección. |
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