Clonación y caracterización de los Superóxido Dismutasa de Amaranto expresada en respuesta a estrés abiótico

"El estrés oxidativo o incremento de especies reactivas de oxígeno (ERO) en plantas generalmente acompaña a diferentes tipos de estrés abiótico como sequía, altas temperaturas y salinidad, afectando la productividad de los cultivos y debido a esto se ha incrementado el estudio de estrés en plan...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: LIZETH BERENICE ORTEGA CRUZ
Tipo de recurso: tesis de maestría
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2009
País:México
Institución:Instituto Potosino de Investigación Científica y Tecnológica
Repositorio:Repositorio Institucional del IPICYT
Idioma:español
OAI Identifier:oai:ipicyt.repositorioinstitucional.mx:1010/697
Acceso en línea:http://ipicyt.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1010/214
http://ipicyt.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1010/697
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:info:eu-repo/classification/Autor/Amaranto
info:eu-repo/classification/Autor/Estrés abiótico
info:eu-repo/classification/cti/2
info:eu-repo/classification/cti/24
info:eu-repo/classification/cti/2415
Descripción
Sumario:"El estrés oxidativo o incremento de especies reactivas de oxígeno (ERO) en plantas generalmente acompaña a diferentes tipos de estrés abiótico como sequía, altas temperaturas y salinidad, afectando la productividad de los cultivos y debido a esto se ha incrementado el estudio de estrés en plantas. Por otro lado, existe el interés mundial de contar con cultivos alternos capaces de producir alimentos. El amaranto es una planta que produce semillas de alta calidad nutritiva y nutraceútica, la planta puede crecer en zonas áridas donde los cultivos tradicionales no logran sobrevivir. En nuestro grupo de trabajo se ha realizado un estudio proteómico comparativo sobre la repuesta de la planta el déficit de agua. De este estudio se encontró el aumento de concentración de una Superóxido Dismutasa (SOD). Las SOD son la primera línea de defensa contra el estrés oxidativo, ocasiona la dismutación del anión superóxido produciendo peróxido de hidrógeno y oxígeno. Existen isoformas de SOD que varían por el co-factor al cual se unen: Cu,Zn-SOD, Fe-SOD, Mn-SOD y Ni-SOD. A partir de los datos de proteínas se diseñaron oligonucleótidos para SOD y se obtuvo un fragmento de 263 pb con homología a Cu,Zn SOD. A partir del fragmento de 263 pb se realizó un RACE al extremo 3’ y 5’ obteniendo un ORF de 459 pb de SOD de amaranto (AhSOD). AhSOD mostró una identidad mayor del 80% con otras Cu,Zn SOD. El gen se clonó en el vector de expresión pET22b(+) y se transformó la cepa de Escherichia coli BL21(DE3) para su sobreexpresión. La proteína recombinante se encontró en la fracción soluble y fue purificada por cromatografía de afinidad. El ensayo de actividad mostró que la AhSOD puede expresarse de forma activa en E. coli AhSOD puede ser empleado para la transformación de plantas con el fin de incrementar su capacidad de acción contra las especies reactivas de oxígeno con el resultado en el aumento de productividad."