Expresión heteróloga y caracterización de una superóxido dismutasa proveniente del arqueón Thermoplasma acidophilum

"Las superóxido dismutasas (SODs) de arqueas termoacidófilas tienen relevancia industrial debido a sus propiedades bioquímicas únicas en comparación a sus homólogas bacterianas. El objetivo de este trabajo fue clonar y expresar el ORF de la SOD (Ta0013) del arqueón termoacidófilo Thermoplasma a...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: JOSHUA EDUARDO ESPARZA DE LARA
Tipo de recurso: tesis de maestría
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2012
País:México
Institución:Instituto Potosino de Investigación Científica y Tecnológica
Repositorio:Repositorio Institucional del IPICYT
Idioma:español
OAI Identifier:oai:ipicyt.repositorioinstitucional.mx:1010/668
Acceso en línea:http://ipicyt.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1010/185
http://ipicyt.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1010/668
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:info:eu-repo/classification/Autor/Caracterización
info:eu-repo/classification/Autor/Expresión
info:eu-repo/classification/Autor/Clonación
info:eu-repo/classification/Autor/Archaea
info:eu-repo/classification/Autor/Thermoplasma acidophilum
info:eu-repo/classification/Autor/Termoacidoestabilidad
info:eu-repo/classification/Autor/Fe-SOD
info:eu-repo/classification/cti/2
info:eu-repo/classification/cti/24
info:eu-repo/classification/cti/2415
Descripción
Sumario:"Las superóxido dismutasas (SODs) de arqueas termoacidófilas tienen relevancia industrial debido a sus propiedades bioquímicas únicas en comparación a sus homólogas bacterianas. El objetivo de este trabajo fue clonar y expresar el ORF de la SOD (Ta0013) del arqueón termoacidófilo Thermoplasma acidophilum y caracterizar su producto estructural y funcionalmente. La producción de la enzima recombinante fue de 43.51 mg/L y se le identificó como una Fe-SOD con un contenido de 2.18 moles de metal/mol de proteína. El análisis electroforético desnaturalizante mostró una banda de 25 kDa que corresponde al peso monomérico calculado. Por otro lado, el análisis de electroforesis nativa evidenció que su estado conformacional es homotetramérico. La proteína fue activa en un amplio intervalo de temperatura (15-60°C) y pH (2-10, valor óptimo 6), su actividad específica fue de 118.5 U/mg a 23°C, fue termorresistente a temperaturas ≤60°C, tuvo un t1/2 ~35 min a 70°C y su actividad se vio afectada únicamente por FeCl2 10 mM y SDS 10 mM. Este trabajo constituye la primera caracterización en detalle que se hace de una SOD recombinante expresada en E. coli proveniente de un organismo del orden Thermoplasmatales. Los resultados obtenidos podrían ser útiles para la producción de la enzima recombinante así como para el desarrollo de cosméticos para la reducción del daño fotooxidante, suplementos para la salud, preservación de alimentos, tratamiento de enfermedades humanas y animales, así como cualquier otra aplicación potencial asociada con la disminución del daño inducido por O2 dentro de los intervalos de temperatura y pH descritos."

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