Expresión en tomate de un polipéptido antigénico con epítopos de 3 exotoxinas bacterianas (DPT) codificado por un gen sintético
Descripción / Resumen Editar Eliminar "Una prioridad actual en el campo de vacunas es el desarrollo de vacunas de subunidades y multicomponentes que no produzcan reacciones adversas y protejan contra varios patógenos. Los problemas de salud causados por las exotoxinas de Corynebacterium diphter...
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2007 |
| País: | México |
| Institución: | Instituto Potosino de Investigación Científica y Tecnológica |
| Repositorio: | Repositorio Institucional del IPICYT |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:ipicyt.repositorioinstitucional.mx:1010/1000 |
| Acceso en línea: | http://ipicyt.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1010/1000 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | info:eu-repo/classification/Autor/Plantas info:eu-repo/classification/Autor/Difteria info:eu-repo/classification/Autor/Tos ferina info:eu-repo/classification/Autor/Tétanos info:eu-repo/classification/cti/2 info:eu-repo/classification/cti/24 info:eu-repo/classification/cti/2415 |
| Sumario: | Descripción / Resumen Editar Eliminar "Una prioridad actual en el campo de vacunas es el desarrollo de vacunas de subunidades y multicomponentes que no produzcan reacciones adversas y protejan contra varios patógenos. Los problemas de salud causados por las exotoxinas de Corynebacterium diphteriae, Bordetella pertussis y Clostridium tetani van desde síntomas leves hasta la muerte. El presente trabajo se enfoca al desarrollo de una vacuna comestible contra la difteria, tos ferina y tétanos en plantas. Se transformó genéticamente a plantas de tomate por medio de Agrobacterium tumefaciens portador de un gen sintético optimizado para plantas el cual codifica para un polipéptido novedoso que contiene dos adyuvantes y seis epítopos inmunoprotectores de las toxinas DPT, unidos por péptidos conectores. Se verificó la integración del gen sintético DPT (sDPT) por PCR en las plantas transgénicas de tomate y se confirmó por Southern blot observándose de 1-2 copias del gen en diversas líneas. Asi mismo se detectó un transcrito específico del tamaño esperado (570 pb) por RT-PCR. El polipéptido codificado por el gen sDPT fue detectado por inmunoensayos in vitro con anticuerpos específicos, con valores equivalentes a 1.9-5.8 μg/g de toxoide diftérico, 0.0003-0.15 μg/g de toxoide pertúsico y 4.5-16.8 μg/g de toxoide tetánico en hojas de tomates transgénicos. Además, se observó que la proteína recombinante expresada en las plantas de tomate fue capaz de inducir anticuerpos específicos en animales.Ratones Balb/c fueron inmunizados por vía oral con el tejido vegetal en tres dosis semanales. En el suero analizado se encontró respuesta del tipo IgG a las exotoxinas diftérica, pertúsica y tetánica inducida por el polipéptido sintético. En el fluído traqueopulmonar se observó una modesta respuesta del tipo IgG. Una respuesta alta del tipo IgA hacia el epítope tetánico fue evidente en los lavados intestinales. Los niveles de respuesta en estos grupos fueron más altos que en el grupo de ratones alimentado con tomate no transformado. Estos resultados sugieren que la proteína recombinante DPT expresada en plantas de tomate puede inducir anticuerpos específicos in vivo y faltaría retar con las toxinas a ratones preinmunizados con tomates que contenienen el gen sDPT para ver si existe protección." |
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