Expresión de péptidos antigénicos y antivirales del virus sincicial respiratorio en plantas de tabaco

"El virus sincicial respiratorio (VSR) es una de las principales causas de infecciones del tracto respiratorio bajo (IRB) en el mundo. Las infecciones por VSR causan anualmente cerca de 34 millones de episodios de IRBs agudas, 66,000 muertes y costos por más de 2.4 miles de millones de dólares....

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: Benita Ortega Berlanga
Tipo de recurso: tesis doctoral
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2016
País:México
Institución:Instituto Potosino de Investigación Científica y Tecnológica
Repositorio:Repositorio Institucional del IPICYT
OAI Identifier:oai:ipicyt.repositorioinstitucional.mx:1010/1799
Acceso en línea:http://ipicyt.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1010/1799
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:info:eu-repo/classification/Autor/RhoA
info:eu-repo/classification/Autor/Expresión transitoria
info:eu-repo/classification/Autor/Agrobacterium tumefaciens
info:eu-repo/classification/Autor/Liquenasa
info:eu-repo/classification/Autor/Proteína de la cápside
info:eu-repo/classification/cti/2
info:eu-repo/classification/cti/24
info:eu-repo/classification/cti/2415
Descripción
Sumario:"El virus sincicial respiratorio (VSR) es una de las principales causas de infecciones del tracto respiratorio bajo (IRB) en el mundo. Las infecciones por VSR causan anualmente cerca de 34 millones de episodios de IRBs agudas, 66,000 muertes y costos por más de 2.4 miles de millones de dólares. A pesar de la importancia del VSR, no existe actualmente una vacuna disponible en el mercado. En este trabajo se desarrolló una construcción que codifica epítopos antigénicos de las proteínas F, G y M del VSR optimizadas para su expresión estable en el citoplasma de células vegetales. La construcción, denominada pBI-VSR, además codifica para péptidos espaciadores ricos en prolina y una región del virus del sarampión para obtener un balance de respuesta inmune Th1/Th2 que ha sido una limitante en trabajos previos en el desarrollo de vacunas contra VSR. Con pBI-VSR se realizó la transformación genética de plantas de tabaco (N. benthamiana) vía Agrobacterium tumefaciens, de las cuales se obtuvieron siete líneas transgénicas para la generación T2. Además se diseñó mediante PCR de fusión un gen que codifica el péptido con actividad antiviral RhoA, el cual fue fusionado a dos moléculas acarreadoras, liquenasa (LicKM) y la proteína de la cápside (CP) del virus del mosaico de la alfalfa para transformar transitoriamente plantas de tabaco, usando un vector de expresión basado en el virus del mosaico del tabaco. Las proteínas de fusión RhoA-LicKM y RhoA2-FLd25CP fueron expresadas eficientemente e inhibieron la replicación del VSR in vitro en un 50% y 80% respectivamente a una menor concentración que el péptido sintético RhoA usado como control. Estos resultados indican el potencial de sistemas de producción de biofármacos en plantas y, para el caso de transformación transitoria, la producción de un péptido antiviral en un tiempo corto y la ventaja que da utilizar moléculas acarreadoras para incrementar la expresión y eficacia."