Cucurbita ficifolia Bouché aumenta la secreción de insulina en la línea celular RINm5F a través de la afluencia de calcio proveniente de retículo endoplásmico

Introducción Cucurbita ficifolia Bouché (C. ficifolia) es una planta Mexicana de uso tradicional para el control de la diabetes tipo 2 (DT2). El efecto hipoglucémico del fruto de C. ficifolia ha sido demostrado en diferentes modelos de DT2 experimentales, así como en pacientes con DT2. El D-quiro-in...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: MARIA ELIZABETH MIRANDA PEREZ
Tipo de recurso: tesis doctoral
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2017
País:México
Institución:Universidad Autónoma Metropolitana
Repositorio:Repositorio Institucional de la UAM Iztapalapa
Idioma:español
OAI Identifier:oai:bindani.izt.uam.mx:0g354f20t
Acceso en línea:https://doi.org/10.24275/uami.0g354f20t
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:info:eu-repo/classification/LEM/Diabetes -- Tratamiento
info:eu-repo/classification/LEM/Medicinal plants
info:eu-repo/classification/LEM/Plantas medicinales
info:eu-repo/classification/LEM/Cucurbita ficifolia
info:eu-repo/classification/LEM/Biology experimental
info:eu-repo/classification/LEM/Diabetes -- Treatment
info:eu-repo/classification/LEM/Biología experimental
info:eu-repo/classification/cti/2
Descripción
Sumario:Introducción Cucurbita ficifolia Bouché (C. ficifolia) es una planta Mexicana de uso tradicional para el control de la diabetes tipo 2 (DT2). El efecto hipoglucémico del fruto de C. ficifolia ha sido demostrado en diferentes modelos de DT2 experimentales, así como en pacientes con DT2. El D-quiro-inositol (DQI) ha sido propuesto como el compuesto active del fruto. Además ha sido reportado que C. ficifolia incrementa la expression del RNAm de insulina y Kir 6.2 (componente del canal de K+ dependiente de ATP (K+ATP), cuando es activado por una sulfonilurea) en células RINm5F. Sin embargo, aún no queda claro si C. ficifolia y DQI causan secreción de insulina por incremento en las concentraciones de calcio intracelular [Ca2+]i, a través del bloqueo de los K+ATP, del reservorio proveniente del retículo endoplásmico (RE) o de la actividad del receptor de incretinas. Aunado a esto, se investigó si el factor de transcripción ATF-2 está involucrado en el aumento en la expresión del RNAm de insulina. Material y métodos El extracto acuoso de C. ficifolia fue obtenido y estandarizado de acuerdo a su contenido en DQI. Las células RINm5F fueron incubadas a diferentes concentraciones (50, 100, 200 and 400 μM) de DQI o C. ficifolia (9, 18, 36 and 72 µg of extracto/mL), y se cuantificaron los cambios en las [Ca2+]i. Las células fueron permeabilizadas con el fluorocromo (fluo 4 acetoximetil ester (Fluo 4-AM) y visualizados en el microscopio confocal. La secreción de insulina fue medida por el método de ELISA. Subsecuentemente, el efecto de C. ficifolia sobre los canales de K+ATP fue evaluado. En este caso, se utilizó un activador de los canales de K+ATP, como lo es diazóxido, para bloquear la afluencia de calcio inducida por C. ficifolia. Adicionalmente, 2-amino-toxidifenil borato (2-APB) fue utilizado para inhibir la afluencia de calcio proveniente de RE, causada por C. ficifolia. También fue evaluado el efecto C ficifolia, utilizando exendina-9 como inhibidor de la afluencia de calcio, proveniente de la actividad del receptor de incretinas. La fosforilación de ATF-2 fue medida por western blot. Resultados Se encontró que DQI solo no aumenta las [Ca2+]i ni la secreción de insulina. Por el contrario, el tratamiento con C ficifolia incrementa las [Ca2+]i en 10 veces comparado con el grupo control. La secreción de insulina incrementó un 46.9 %. Además, C. ficifolia incrementa 2.5 la fosforilación de ATF-2 a los 60 minutos, lo que probablemente esté relacionado con el aumento en la expresión del RNAm de insulina. En presencia de diazóxido, C. ficifolia disminuye las [Ca2+]i en un 50 %, y la secreción de insulina es aumentada en solo un 36.4%. Por otro lado, en presencia de 2-APB, C. ficifolia incrementa las [Ca2+]i 18 veces, indicando un efecto aditivo, la secreción de insulina se mantiene constante. Estos resultados indican que C. ficifolia no bloquea los canales de K+ATP, sin embargo, se observó efecto en las [Ca2+]i provenientes de RE. En presencia de exendina-9, C. ficifolia incrementa 2 veces la [Ca2+]i, observándose baja actividad del receptor de incretinas en comparación con la actividad del receptor de RE. Conclusiones Las propiedades hipoglucemiantes de C. ficifolia pueden ser explicadas, en parte por el efecto secretagogo de insulina a través del incremento en las [Ca2+]i provenientes de los reservorios del RE. Sugerimos que el mecanismo de acción de C. ficifolia es diferente al de los medicamentos hasta ahora utilizados para el tratamiento de la DT2, como las sulfonilureas. Estos resultados indican que C. ficifolia puede ser un potente agente natural para el control de la DT2.

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