Variación del contenido de lípidos en la hemolinfa del camarón blanco Litopenaeus vannamei como respuesta al tratamiento con rCHH-B2
Las hormonas hiperglucémicas de crustáceos (CHHs) son péptidos producidos en el complejo del órgano X - glándula del seno (OX-GS), uno de los centros neuroendocrinos más importantes en crustáceos. Estas hormonas actúan sobre diversos tejidos, principalmente hepatopáncreas y músculo, promoviendo la g...
| Author: | |
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| Format: | master thesis |
| Status: | Published version |
| Publication Date: | 2018 |
| Country: | México |
| Institution: | Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada |
| Repository: | Repositorio Institucional CICESE |
| Language: | Spanish |
| OAI Identifier: | oai:cicese.repositorioinstitucional.mx:1007/2599 |
| Online Access: | http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/2599 |
| Access Level: | Open access |
| Keyword: | info:eu-repo/classification/Autor/CHH, hormonas recombinantes, metabolismo lipídico, metabolismo glucémico, crustáceos, L. vannamei info:eu-repo/classification/Autor/recombinant hormones, lipid metabolism, glycemic metabolism, crustacean info:eu-repo/classification/cti/2 info:eu-repo/classification/cti/24 info:eu-repo/classification/cti/2499 info:eu-repo/classification/cti/249999 |
| Summary: | Las hormonas hiperglucémicas de crustáceos (CHHs) son péptidos producidos en el complejo del órgano X - glándula del seno (OX-GS), uno de los centros neuroendocrinos más importantes en crustáceos. Estas hormonas actúan sobre diversos tejidos, principalmente hepatopáncreas y músculo, promoviendo la glucogenólisis e inhibiendo la gluconeogénesis. Son consideradas hormonas multifuncionales debido a que participan en diversas respuestas fisiológicas de gran importancia. La actividad hiperlipidémica de las CHHs observada en diferentes especies de cangrejos ha permitido sugerir que el metabolismo de lípidos está bajo control endocrino en crustáceos. No obstante, a pesar de la importancia de los lípidos como fuente energética para funciones metabólicas esenciales, a la fecha no se ha estudiado su regulación endocrina en otras especies de crustáceos, incluyendo el camarón blanco Litopenaeus vannamei, la especie comercial más cultivada y pescada en el mundo. A la fecha existen 4 variantes diferentes de CHH descritas para esta especie: CHH-A, CHH-B1, CHH-B2 y LvCHH_PO_ES. En los últimos años se han desarrollado herramientas biotecnológicas que han permitido la producción de hormonas recombinantes, lo que ha ampliado el conocimiento acerca de su funcionamiento y de los diferentes procesos en los que participan. En este trabajo se llevó a cabo la determinación del efecto de CHH recombinante sobre el nivel de lípidos y glucosa en la hemolinfa de camarones sub-adultos de L. vannamei. Los ensayos de expresión y purificación se llevaron a cabo utilizando como modelo a la hormona recombinante CHH-A (rCHH-A). Se utilizaron 2 plataformas de expresión diferentes: 1) E. coli BL21 Star/pET44a(+) y 2) expresando rCHH-A en la levadura Pichia pastoris en medio mínimo y rico. Aun cuando en E. coli la neurohormona fue producida como proteína de fusión (NusA-CHH-A), no fue posible eliminar los dominios adicionales en el N-terminal para obtener la hormona nativa. Debido a que no se logró purificar la cantidad necesaria de rCHH-A en el tiempo requerido, los bioensayos se realizaron con la hormona rCHH-B2 purificada previamente en el laboratorio utilizando camarones sub-adultos ablacionados bilateralmente aclimatados a condiciones hiper-osmóticas (35 ups) y a una temperatura de 26 °C. Los muestreos de hemolinfa fueron realizados a 0.5, 1, 3 y 6 h post-inyección de la hormona. Como control se utilizaron organismos no ablacionados sin inyectar, así como ablacionados bilateralmente... |
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