Papel de la dopamina y de la neurohormona recombinante CHH-B1 en la modulación de respuestas fisiológicas en el camarón blanco Litopenaeus vannamei
La hormona hiperglucémica de crustáceos (CHH) es una de las neurohormonas más importantes sintetizadas en el órgano X-glándula del seno. De las diferentes CHH’s producidas en Litopenaeus vanammei, CHH-B1 ha mostrado actividad hiperglucémica, sin embargo no se descarta su participación en otras func...
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| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2011 |
| País: | México |
| Institución: | Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada |
| Repositorio: | Repositorio Institucional CICESE |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:cicese.repositorioinstitucional.mx:1007/2631 |
| Acceso en línea: | http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/2631 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | info:eu-repo/classification/Autor/Camarón blanco,Litopenaeus vannamei,Ciencias del mar info:eu-repo/classification/cti/2 info:eu-repo/classification/cti/24 info:eu-repo/classification/cti/2414 |
| Sumario: | La hormona hiperglucémica de crustáceos (CHH) es una de las neurohormonas más importantes sintetizadas en el órgano X-glándula del seno. De las diferentes CHH’s producidas en Litopenaeus vanammei, CHH-B1 ha mostrado actividad hiperglucémica, sin embargo no se descarta su participación en otras funciones como muda y osmoregulación. Por otra parte, se ha encontrado que aminas biogénicas como la dopamina regulan algunas respuestas fisiológicas de L. vannamei bajo condiciones de estrés. En el presente trabajo se llevó a cabo el estudio del papel de CHH-B1 recombinante con un extremo C-terminal adicional (CHH-B1His) y del impacto de la dopamina en la modulación de respuestas fisiológicas en la hemolinfa del camarón blanco L. vannamei bajo condiciones hiper-osmóticas. CHH-B1His fue expresada en P. pastoris y analizada mediante PAGE-SDS. Las condiciones óptimas para su expresión fueron 3 días de cultivo y 2% de metanol. La neurohormona fue escalada y purificada mediante cromatografía de afinidad obteniéndose un rendimiento de 5.72 mg/L. Se realizaron bioensayos con subadultos de L. vannamei aclimatados a 26 °C y 35 ‰, inyectando 2 µg de CHHB1His o 2x10-6 moles/camarón de dopamina en periodo de intermuda. La hemolinfa de camarones fue muestreada de manera individualizada a las 0.5, 1, 2, 4 y 24 h post-inyección para llevar a cabo la determinación de diferentes respuestas fisiológicas. CHH-B1His provocó un aumento significativo en la concentración de glucosa y triglicéridos de la hemolinfa, presentando valores máximos a 1 h y 2 h postinyección respectivamente. Así mismo, se observó una disminución significativa en los niveles de proteínas entre las 4 y 24 h post-tratamiento, mientras que la inyección de dopamina aumentó de manera significativa los niveles de glucosa en los camarones con un máximo registrado a 1 h post-inyección y disminuyó progresivamente los niveles de triglicéridos. Sin embargo, el neurotransmisor no tuvo efecto sobre los niveles de proteínas totales en la hemolinfa de los camarones. Ninguna de las dos sustancias aplicadas tuvo un efecto en la concentración de oxihemocianina, por lo que no se observaron cambios significativos en la relación oxihemocianina/proteínas totales en comparación con el control. El aumento en los niveles de glucosa por la inyección de CHH-B1His y dopamina sugiere que la hiperglucemia observada con dopamina estuvo mediada a través de CHH-B1His. Asimismo, CHH-B1His y dopamina ocasionaron un incremento en la presión osmótica de los organismos. Sin embargo, CHH-B1His provocó un aumento en la capacidad osmorreguladora contrario a la disminución observada en el tratamiento con dopamina. Estos resultados en conjunto sugieren que tanto la neurohormona CHH-B1His como la dopamina tuvieron un efecto metabólico en L. vannamei bajo condiciones hiper-osmóticas. Así mismo se sugiere que la neurohormona mejoró la capacidad de hipo-osmorregular de los organismos, y que la dopamina tuvo una posible función como neuromodulador en la activación de los mecanismos de osmorregulación. |
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