Optimización de la producción heteróloga de ácido docosahexaenoico en E. coli
RESUMEN: Algunas bacterias marinas, como Moritella marina, son capaces de producir ácido docosahexaenoico (DHA) gracias a un complejo enzimático llamado complejo Pfa. Este complejo expresado en Escherichia coli es capaz de producir DHA. El objetivo de esta tesis es encontrar las condiciones genética...
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Fecha de publicación: | 2018 |
| País: | España |
| Institución: | Universidad de Cantabria (UC) |
| Repositorio: | UCrea Repositorio Abierto de la Universidad de Cantabria |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:repositorio.unican.es:10902/14876 |
| Acceso en línea: | http://hdl.handle.net/10902/14876 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Síntesis de ácidos grasos Ácidos grasos poliinsaturados Ácido docosahexaenoico Moritella marina Cerulenina FabH Fatty acid synthesis Polyunsaturated fatty acid Docosahexaenoic acid M.marina Cerulenin |
| Sumario: | RESUMEN: Algunas bacterias marinas, como Moritella marina, son capaces de producir ácido docosahexaenoico (DHA) gracias a un complejo enzimático llamado complejo Pfa. Este complejo expresado en Escherichia coli es capaz de producir DHA. El objetivo de esta tesis es encontrar las condiciones genéticas y metabólicas para mejorar la producción de DHA en E. coli u otros organismos. Primeramente, se estudió el patrón de expresión de los promotores nativos, que fueron reemplazados por promotores fuertes e inducibles con el objetivo de incrementar la expresión de los genes, y finalmente de DHA. En segundo lugar, se estudió la alteración de los flujos metabólicos y se optimizó la disponibilidad de sustratos mediante la adición del inhibidor cerulenina, y la deleción del gen fabH. En tercer lugar, se implementaron distintos mecanismos de acumulación del producto final. Por último, se mejoró el crecimiento de E. coli a bajas temperaturas mediante el uso de chaperoninas psicrófilas con el objetivo de restaurar la actividad chaperona. Todas estas aproximaciones han incrementado la eficiencia final del proceso de síntesis de DHA y otros ácidos grasos poliinsaturados. |
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