Resveratrol supplementation during in vitro maturation
La calidad de los oocitos juega un papel importante en la producción in vitro de embriones (PIVE). Factores intrínsecos y extrínsecos pueden alterar la calidad de los oocitos, afectando su competencia para el desarrollo. El objetivo del estudio fue evaluar el efecto de la suplementación con resverat...
| Autor: | |
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Fecha de publicación: | 2019 |
| País: | España |
| Institución: | Universitat Autònoma de Barcelona |
| Repositorio: | Dipòsit Digital de Documents de la UAB |
| Idioma: | inglés |
| OAI Identifier: | oai:ddd.uab.cat:213690 |
| Acceso en línea: | https://ddd.uab.cat/record/213690 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Oòcits Embriologia veterinària |
| Sumario: | La calidad de los oocitos juega un papel importante en la producción in vitro de embriones (PIVE). Factores intrínsecos y extrínsecos pueden alterar la calidad de los oocitos, afectando su competencia para el desarrollo. El objetivo del estudio fue evaluar el efecto de la suplementación con resveratrol durante la maduración in vitro (MIV) sobre la calidad de los oocitos en especies de interés veterinario. Tres estudios fueron llevados a cabo para testar el posible efecto beneficioso del resveratrol para la mejora de la competencia de desarrollo in vitro de los oocitos de mala calidad. Estudio I: PIVE de gatos domésticos obtenidos de ovarios refrigerados (4ºC) durante 24 y 48 horas. Los oocitos obtenidos de ovarios refrigerados fueron MIV con o sin 5μM de resveratrol. La competencia meiótica, niveles de especies reactivas de oxigeno (ROS) y glutatión (GSH), la tasa de blastocistos obtenidos y su calidad fueron evaluadas. Los resultados mostraron que el tratamiento con resveratrol no tenía efecto en la competencia meiótica de los oocitos. Los grupos tratados con resveratrol tenían menores niveles de ROS y mayores niveles de GSH comparado con los respectivos controles. Además, la suplementación con resveratrol incrementó significativamente la producción de blastocistos en el grupo refrigerado 48 horas y mejoró también la calidad de blastocistos en ambos grupos (24 y 48h). Estudio II: PIVE de oocitos de cabras prepúberes seleccionados mediante la tinción de brilliant cresyl blue (BCB). Después ser clasificados en: BCB+ (oocitos con crecimiento finalizado) y BCB- (oocitos en crecimiento) los oocitos fueron MIV con y sin 1μM de resveratrol. Los niveles de ROS, GSH, y ATP, la actividad y la distribución mitocondrial, la tasa de blastocistos obtenidos y su calidad fueron evaluadas. No se encontraron diferencias en los niveles de ROS, de ATP y la actividad mitocondrial entre grupos. Los niveles de GSH fueron significativamente mayores en ambos grupos tratados con resveratrol comparado con sus controles. Los oocitos tratados con resveratrol mostraron una proporción mayor de mitocondrias activas agrupadas comparado con los grupos control. La tasa de blastocistos fue significativamente mayor en los oocitos BCB+ madurados con resveratrol comparado con los demás grupos. Ninguna diferencia fue observada en la calidad de blastocistos entre grupos. Estudio III: Resultados de la fecundación in vitro (FIV) de oocitos de ovejas prepúberes expuestos a cadmio (Cd). Los oocitos fueron MIV en presencia de 2μM de cadmio y de diferentes concentraciones de resveratrol: 0μM (Cd), 1μM (Cd-Resv1μM) y 2μM (Cd-Resv2μM). Oocitos madurados sin Cd fueron usados como control. Los resultados de la FIV, la distribución de los gránulos corticales (CGs), los niveles de ROS y la distribución y actividad mitocondrial, fueron evaluados. Los grupos control, Cd-Resv1μM y Cd-Resv2μM tuvieron una mayor tasa de fertilización monospermal en comparación con el grupo Cd (P<0.05). El porcentaje de oocitos en MII con los GCs distribuidos en el córtex fue mayor (P<0.05) en los grupos control y Cd-Resv1μM que en el grupo Cd. El porcentaje de oocitos MII que exhibían una distribución homogénea de las mitocondrias en el citoplasma fue mayor en los grupos control, Cd-Resv1μM y Cd-Resv2μM que en el grupo Cd (P<0.05). Menor actividad mitocondrial fue obtenida en los grupos control y Cd-Resv1μM comparado con el grupo Cd. Los niveles de ROS fueron menores en el control, Cd-Resv1μM y Cd-Resv2μM que en el grupo Cd. Concluyendo, la suplementación con resveratrol durante la MIV permite mejorar la calidad oocitaria y la PIVE en especies de interés veterinario, mediante la regulación del estado bioenergético/redox de los oocitos y la distribución citoplasmática de organelas. |
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