Modelo de cocultivos celulares hepáticos 3D dentro de un biorreactor de flujo radial sobre biomateriales modificados por plasma
Se cultivaron hepatocitos de la línea celular HepG2 sobre andamios de ácido L-poliláctico (PLLA) modificados en su superficie con polipirrol dopado con yodo (Ppy-I) y células endoteliales HUVEC, estos resultados se compararon con los datos de los cultivos únicamente con células HepG2 y con los andam...
| Autor: | |
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2015 |
| País: | México |
| Institución: | Universidad Autónoma Metropolitana |
| Repositorio: | Repositorio Institucional de la UAM Iztapalapa |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:bindani.izt.uam.mx:kh04dp788 |
| Acceso en línea: | https://doi.org/10.24275/uami.kh04dp788 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | info:eu-repo/classification/LEM/Liver Transplantation info:eu-repo/classification/LEM/Ingeniería biomédica info:eu-repo/classification/LEM/Cell culture info:eu-repo/classification/LEM/Polymers in medicine info:eu-repo/classification/LEM/Cultivo de células info:eu-repo/classification/LEM/Hígados -- Transplante info:eu-repo/classification/LEM/Materiales biomédicos info:eu-repo/classification/LEM/Polímeros en medicina info:eu-repo/classification/LEM/Biomedical materials info:eu-repo/classification/LEM/Biomedical engineering info:eu-repo/classification/cti/7 |
| Sumario: | Se cultivaron hepatocitos de la línea celular HepG2 sobre andamios de ácido L-poliláctico (PLLA) modificados en su superficie con polipirrol dopado con yodo (Ppy-I) y células endoteliales HUVEC, estos resultados se compararon con los datos de los cultivos únicamente con células HepG2 y con los andamios sin recubrir. Para verificar el correcto funcionamiento y proliferación del cultivo celular se verificaron las condiciones morfológicas y la producción de proteínas por parte de las células sembradas. Se monitoreo la morfología y proliferación mediante el uso de microscopia de amplio espectro para corroborar la proliferación celular sobre el material tomando imágenes de los materiales con las células tres veces por semana. Se emplearon técnicas de inmunoflorescencia, que permiten teñir ciertos organelos celulares o proteínas de interés, se utilizó el marcador de Hoetscht, para diferenciar los núcleos de ambos tipos celulares, y el marcador del factor de coagulación VIII para localizar únicamente las células HUVEC. Con ayuda de la microscopia confocal, se obtuvieron imágenes con varios focos de profundidad, para ver la distribución celular en el interior del andamio, y poder discernir el material y las células teñidas para realizar una superposición de ambas imágenes. Realizando la técnica cromatográfica en el sobrenadante de cultivo, se midió de manera indirecta la cantidad de proteínas totales y específicas, que secretan las células HepG2. Finalmente, se construyó un biorreactor de flujo radial que permite realizar cocultivos celulares tridimensionales más eficientes, sobre andamios modificados en su superficie, obteniendo una mejor proliferación celular y una mejor producción de proteínas hepáticas entre las que destaca específicamente una mejor secreción de albumina. De estos estudios se concluye que obtuvimos un modelo de cocultivo celular en un andamio recubierto con Ppy-I, que puede ser utilizado en biorreactores de a flujo radial para incrementar las propiedades fisiológicas de los hepatocito |
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