Incremento en la dosis génica (pcbAB, pcbC y penDE) en Penicillium chrysogenum para elevar la producción de penicilina G en fermentación sólida y líquida
En el presente trabajo se evaluó la producción de penicilina por sobreexpresión de genes de la ruta de la biosíntesis de penicilina en cepas de Penicillium chrysogenum de baja (Wisconsin 54-1255) y de alta (P2-32) producción. Se llevó a cabo la siguiente estrategia para elevar la producción: inicial...
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2009 |
| País: | México |
| Institución: | Universidad Autónoma Metropolitana |
| Repositorio: | Repositorio Institucional de la UAM Iztapalapa |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:bindani.izt.uam.mx:s7526c702 |
| Acceso en línea: | https://doi.org/10.24275/uami.s7526c702 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | info:eu-repo/classification/LEM/Micología info:eu-repo/classification/LEM/Penicillin info:eu-repo/classification/LEM/Penicilina info:eu-repo/classification/LEM/Antibiotics -- Synthesis info:eu-repo/classification/LEM/Antibióticos info:eu-repo/classification/LEM/Mycology info:eu-repo/classification/cti/6 |
| Sumario: | En el presente trabajo se evaluó la producción de penicilina por sobreexpresión de genes de la ruta de la biosíntesis de penicilina en cepas de Penicillium chrysogenum de baja (Wisconsin 54-1255) y de alta (P2-32) producción. Se llevó a cabo la siguiente estrategia para elevar la producción: inicialmente, se identificaron los genes responsables de la biosíntesis, en una biblioteca genómica de P. chrysogenum ligada a un cósmido (IztapaCos). El conjunto de los tres genes de biosíntesis de penicilina fueron detectados mediante sondas marcadas que corresponden a los extremos del grupo (genes pcbAB y penDE). Los genes fueron aislados de las colonias de E. coli que resultaron positivas, utilizando el método de lisis alcalina, y posteriormente se transformaron las cepas Wisconsin 54-1255, P2-32 y npe10 (control) con el “cluster” o conjunto de genes. Las cepas transformadas fueron identificadas mediante resistencia a fleomicina, ya que el vector contiene un gen de resistencia para este antibiótico. Para una primera elección de las mejores transformantes se realizaron bioensayos en cilindros de agar, y fueron elegidas para los estudios en fermentación líquida y sólida las que produjeron mayor concentración de penicilina con respecto a la cepa parental. Considerando la producción basal de penicilina de las cepas controles, se obtuvieron los siguientes resultados: en la cepa P2-32 se presentó mayor producción en las transformantes en los dos tipos de fermentación, con un 158.38% en fermentación líquida y 92.92% en sólida, con respecto a la cepa Wisconsin en la que la producción en fermentación sólida fue del 67.3%. Los resultados mostraron que al incrementar el número de copias de los genes se incrementó la producción de penicilina. |
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