Silenciamiento simultáneo no letal de los genes de arginina descarboxilasa de Arabidopsis thaliana mediante un microRNA artificial

"Las poliaminas están involucradas en el crecimiento, desarrollo y respuesta al estrés en plantas. En Arabidopsis thaliana, el primer paso en la biosíntesis de las poliaminas (PAs) es catalizado por la arginina descarboxilasa (ADC), enzima limitante con dos isoformas codificadas por los genes p...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: ANA ISABEL CHAVEZ MARTINEZ
Tipo de recurso: tesis de maestría
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2015
País:México
Institución:Instituto Potosino de Investigación Científica y Tecnológica
Repositorio:Repositorio Institucional del IPICYT
OAI Identifier:oai:ipicyt.repositorioinstitucional.mx:1010/1524
Acceso en línea:http://ipicyt.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1010/1524
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:info:eu-repo/classification/Autor/Poliaminas
info:eu-repo/classification/Autor/Arginina descarboxilasa
info:eu-repo/classification/Autor/ABA
info:eu-repo/classification/Autor/ABI3
info:eu-repo/classification/Autor/Estrés abiótico
info:eu-repo/classification/cti/2
info:eu-repo/classification/cti/24
info:eu-repo/classification/cti/2415
info:eu-repo/classification/cti/241502
Descripción
Sumario:"Las poliaminas están involucradas en el crecimiento, desarrollo y respuesta al estrés en plantas. En Arabidopsis thaliana, el primer paso en la biosíntesis de las poliaminas (PAs) es catalizado por la arginina descarboxilasa (ADC), enzima limitante con dos isoformas codificadas por los genes parálogos AtADC1 y AtADC2. Se ha descrito que mutantes insercionales de T-DNA sencillas de ambos parálogos no muestran fenotipos en desarrollo, sin embargo; la mutante adc2 muestra sensibilidad al estrés salino. En el caso de la doble mutante de los genes ADC1 y ADC2 de Arabidopsis se ha descrito que sus semillas no son viables debido a que no se formaron los embriones. Para obtener plantas de A. thaliana con silenciamiento simultáneo no letal de los genes AtADC1 y AtADC2 se construyó un vector que expresa el microRNA artificial pMDC32-amirR:adc, cuyo blanco es la región conservada entre ambos parálogos. Arabidopsis fue transformada con el vector pMDC32-amirR:adc para generar plantas transgénicas en las que podría reprimirse la expresión de los genes AtADC1 y AtADC2. Se obtuvieron 10 líneas de plantas transgénicas (mWs1 a mWs10) que fueron evaluadas bajo estrés salino (NaCl 125 mM) y en presencia de la fitohormona ácido abscísico (ABA 1 μM). Se seleccionó la línea transgénica mWs8 que presentó mayor sensibilidad a los tratamientos en comparación con la parental y las mutantes sencillas adc1 y adc2. Las plantas de la línea mWs8, tuvieron un retardo en la floración y defectos en la formación de semillas y en ellas disminuyeron los transcritos de los genes AtADC1 y AtADC2 y los niveles de PAs libres. Por lo tanto, el transgén amirR:adc sí provoca el silenciamiento simultáneo no letal de AtADC1 y AtADC2 que afecta el desarrollo de las plantas y aumenta su sensibilidad al estrés salino y a la aplicación de ABA. La sensibilidad de la línea mWs8 al ABA podría deberse a una mayor expresión del gen ABI3, regulador de la vía de señalización del ABA. La línea silenciante mWs8 es un nuevo sistema modelo para el estudio de la función de las PAs en el desarrollo y la respuesta al estrés en plantas."

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