Aislamiento y caracterización de toxinas Cry de Bacillus thuringiensis con actividad citócida sobre células de cáncer cervicouterino in vitro e in vivo

Bacillus thuringiensis, es una bacteria gram positiva, considerada cosmopolita. Formadora de esporas que, durante su síntesis una mezcla de proteínas denominadas δ-endotoxinas, conocidas también como proteínas Cry y Cyt, son depositadas como inclusiones intracelulares en un segundo compartimento ubi...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: Gretel Mendoza Almanza
Tipo de recurso: tesis doctoral
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2011
País:México
Institución:Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada
Repositorio:Repositorio Institucional CICESE
Idioma:español
OAI Identifier:oai:cicese.repositorioinstitucional.mx:1007/2495
Acceso en línea:http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/2495
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:info:eu-repo/classification/Autor/Bacillus thuringiensis
info:eu-repo/classification/cti/2
info:eu-repo/classification/cti/24
info:eu-repo/classification/cti/2414
Descripción
Sumario:Bacillus thuringiensis, es una bacteria gram positiva, considerada cosmopolita. Formadora de esporas que, durante su síntesis una mezcla de proteínas denominadas δ-endotoxinas, conocidas también como proteínas Cry y Cyt, son depositadas como inclusiones intracelulares en un segundo compartimento ubicado en posición paraesporal. Estas inclusiones paraesporales tienen un alto valor como proteínas insecticidas para su uso en aerosoles y en cultivos transgénicos. Los genes cry son muy diversos. Su distribución en la naturaleza esta directamente relacionada con la distribución de diferentes especies de insectos. Por lo tanto, el territorio mexicano resulta atractivo para estudiar genes cry. Recientemente se han encontrado algunas cepas de B. thuringiensis que producen proteínas de inclusión citotóxicas para cultivos celulares de mamíferos, incluyendo, líneas celulares de cáncer humano, a las que se ha agrupado en una nueva familia de endotoxinas denominado Parasporinas. En este estudio se aislaron 28 cepas de B. thuringiensis de la región Ensenada-Tijuana, productoras de cristales, los cuales fueron caracterízados morfológicamente. Las proteínas Cry contenidas en los cristales fueron caracterizadas molecularmente y sometidas a un análisis de actividad tóxica tanto en larvas de insectos como en diferentes células de humano. Se identificaron dos toxinas no hemolíticas, provenientes de las cepas 6-1 y 10-2 con actividad citócida importante en tumores inducidos en ratones nude con células HeLa originarias de células de cáncer cervicouterino con Virus del Papiloma Humano (VPH) tipo 18, que sumado al VPH 16 son los agentes causales del 70% de los casos de cancer cervicouterino en el mundo. Las toxinas provenientes de 6-1 y 10-2, eliminan tumores inducidos de 0.8 a 1.4 cm a partir de una concentración de 10 µg/ml, aparentemente por apoptosis.