AISLAMIENTO, CARACTERIZACIÓN Y EXPRESIÓN DEL cDNA DE CATALASA DE CAMARÓN BLANCO Penaeus vannamei

La catalasa (EC 1.11.1.6) es una óxido-reductasa que convierte el peróxido de hidrógeno a oxígeno y agua de acuerdo con la siguiente reacción: 2H2O2 + catalasa --> 2H2= + O2. Esta enzima está involucrada en la defensa contra daño oxidativo por peróxido de hidrógeno (Sanford & Katz, 1989). La...

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Detalles Bibliográficos
Autor: OLGA LIDIA TAVARES SÁNCHEZ
Tipo de recurso: tesis de maestría
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2001
País:México
Institución:Centro de Investigación en Alimentación y Desarrollo
Repositorio:Repositorio Institucional del CIAD
Idioma:español
OAI Identifier:oai:ciad.repositorioinstitucional.mx:1006/709
Acceso en línea:http://ciad.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1006/709
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:info:eu-repo/classification/BIOQUIMICA/TECNOLOGIA DE ALIMENTOS DE ORIGEN ANIMAL
info:eu-repo/classification/cti/2
info:eu-repo/classification/cti/23
info:eu-repo/classification/cti/2302
Descripción
Sumario:La catalasa (EC 1.11.1.6) es una óxido-reductasa que convierte el peróxido de hidrógeno a oxígeno y agua de acuerdo con la siguiente reacción: 2H2O2 + catalasa --> 2H2= + O2. Esta enzima está involucrada en la defensa contra daño oxidativo por peróxido de hidrógeno (Sanford & Katz, 1989). La catalasa es una enzima altamente conservada que se ha estudiado en bacterias, plantas, vertebrados y algunos insectos. En crustáceos decápodos, la información sobre catalasa es aún muy limitada, es por ello, que el objetivo general de este trabajo fue el aislar y caracterizar el cDNA de catalasa de camarón blanco Penaeus vannamei y detectar su expresión. La estrategia de clonación se inició con una amplificación por PCR a partir de un banco de genes de hepatopáncreas y utilizando oligonucleótidos degenerados correspondientes a regiones altamente conservadas en las catalasas. El fragmento amplificado de 0.9 Kb se clonó y secuenció para confirmar la identidad de catalasa. Este fragmento se utilizó como sonda para realizar un cribado de banco de genes por hibridación y de esta manera obtener el cDNA completo, sin embargo, esta estrategia no fue exitosa. Por lo anterior, se utilizó la estrategia conocida como Amplificación Rápida de Extremos de cDNA (RACE) utilizando RNA total aislado de hepatopáncreas y oligonucleótidos específicos. Se logró amplificar, clonar y secuenciar los dos extremos faltantes del cDNA de catalasa, de tal manera que se obtuvo una secuencia continua con un marco de lectura abierta. La secuencia nucleotídica del cDNA completo de catalasa caracterizado es de 1698 pb, compuesto por 78 pb en la región 5’- no traducida (5’-UTR), 1515 pb en la secuencia codificante y 105 pb en la región 3’- no traducida (3’-UTR). La secuencia deducida de aminoácidos contiene 505 residuos que forman un polipéptido (subunidad) con peso molecular calculado de 57.267 kDa y pI de 7.0. La secuencia de aminoácidos de la catalasa de camarón blanco tiene una alta similitud con otras catalasas, con los valores más altos con el homólogo de puerco Sus scrofa con 71 % de identidad, de humanos Homo sapiens con 69 %, mosca de la fruta Drpsophila melanogaster con 66 %, con el nemátodo Caenorhabditis elegans con 59 % y con la bacteria bacillus subtilis con 55 %.

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