Relaciones estructura-inmunogenicidad en las formas nativa y recombinante del alergeno principal de la mostaza

Se ha amplificado mediante pcr la secuencia genómica que codifica el alergeno sin a 1. Siete clones han sido analizados, y uno de ellos se utilizo en la realización de diversas construcciones de expresion en e. Coli. La construcción llevada a cabo en el plasmido pgex-2t expresa la proteína recombina...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: González de la Peña, Manuel Ángel
Tipo de recurso: tesis doctoral
Fecha de publicación:2002
País:España
Institución:Universidad Complutense de Madrid (UCM)
Repositorio:Docta Complutense
Idioma:español
OAI Identifier:oai:docta.ucm.es:20.500.14352/62513
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/20.500.14352/62513
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:Inmunología Antígenos
Inmunología
Bioquímica (Biología)
2412 Inmunología
2302 Bioquímica
Descripción
Sumario:Se ha amplificado mediante pcr la secuencia genómica que codifica el alergeno sin a 1. Siete clones han sido analizados, y uno de ellos se utilizo en la realización de diversas construcciones de expresion en e. Coli. La construcción llevada a cabo en el plasmido pgex-2t expresa la proteína recombinante en forma de proteína de fusión con la glutation s-transferasa. Mediante esta construcción se ha logrado aislar el alergeno recombinante en forma soluble (rsinal). Se ha caracterizado inmunologicamente a rsinal, empleando para ello suero policlonal de conejo, anticuerpos monoclonales y sueros de pacientes alérgicos a mostaza. Asimismo, se ha comprobado su resistencia a la digestión con tripsina. En todos los ensayos realizados, rsinal mostro un comportamiento virtualmente idéntico al alergeno nativo. Finalmente, se han llevado a cabo estudios de reactividad cruzada entre sin a 1 y las napinas de colza, las cuales son descritas como alergenos por vez primera en el presente trabajo