Experimental models in non-alcoholic steatohepatitis and effects of therapeutic strategies based on gut microbiota
La malaltia de fetge gras no alcohòlic (EHGNA) i la seva forma progressiva, la esteatohepatitis no alcohòlica (EHNA), constitueixen avui dia, un important problema de salut pública. Actualment no existeixen teràpies aprovades que permetin revertir la progressió de la EHNA pel que ens veiem en la nec...
| Autor: | |
|---|---|
| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2023 |
| País: | España |
| Institución: | CBUC, CESCA |
| Repositorio: | TDR. Tesis Doctorales en Red |
| OAI Identifier: | oai:www.tdx.cat:10803/690353 |
| Acceso en línea: | http://hdl.handle.net/10803/690353 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Models animals Modelos animales Animal models Esteatohepatitis no alcohòlica Esteatohepatitis no alcohólica Non-alcoholic steatohepatitis Microbiota intestinal Gut microbiota Ciències de la Salut 00 |
| Sumario: | La malaltia de fetge gras no alcohòlic (EHGNA) i la seva forma progressiva, la esteatohepatitis no alcohòlica (EHNA), constitueixen avui dia, un important problema de salut pública. Actualment no existeixen teràpies aprovades que permetin revertir la progressió de la EHNA pel que ens veiem en la necessitat de buscar nous tractaments i d’identificar i desenvolupar nous models preclínics que imitin tan bé com sigui possible la patologia en humans. La microbiota intestinal ha estat objecte de gran interès en els últims anys a causa de la seva associació amb els trastorns metabòlics, incloent-hi la EHGNA. Per tant, l’ús de teràpies basades en microbiota intestinal per al tractament o la prevenció de la EHGNA, s’ha considerat com una aproximació interessant. Aquesta tesi és la continuació d’un treball previ del nostre grup, en el qual un model de EHNA en rata induït per una dieta de 8 setmanes alta en greixos i en glucosa i fructosa (HFGFD), ens va permetre dilucidar el vincle entre la resistència a la insulina (IR), la disfunció endotelial i la microbiota intestinal en el desenvolupament de la hipertensió portal (HP), en absència de fibrosi. En primer lloc, ens vam proposar avaluar la persistència de la HP i els mecanismes subjacents en un model de rata induït per la dieta HFGFD durant 36 setmanes. Trobem que, el greix hepàtic per se (en absència de disfunció endotelial o fibrosi), és capaç d’induir HP a causa d’un marcat augment de l’àrea dels hepatòcits que promou la reducció mecànica de l’àrea sinusoidal hepàtica. En segon lloc, tenint en compte que el nostre grup va demostrar una millora de la HP mitjançant el trasplantament de microbiota fecal (TMF), utilitzem una combinació microbiana de composició definida, com una alternativa més confortable per al pacient, per a provar els seus efectes en dos models in vivo de EHNA en rosegadors: un model de rata induït per la dieta HFGFD durant 8 setmanes i el model de ratolí STAM™. En les rates amb EHNA, es va observar una millora de la HP i de la funció endotelial. Els canvis en la composició microbiana intestinal també van revelar que la combinació bacteriana va aconseguir una substitució més definida i rica de la microbiota que el TMF. A més, la transcriptómica hepàtica va suggerir una regulació beneficiosa de les vies profibrogèniques. En el model de ratolí STAM™, es va confirmar la millora de la fibrosi histològica, reduint-se significativament les àrees positives en col·lagen i fibronectina en fetge a les 12 setmanes. La combinació bacteriana també va disminuir l’activitat EHGNA (NAS, de l’anglès NAFLD Activity Score), d’acord amb una disminució de la esteatosi i de la balonización hepatocitaria. A més, va disminuir la inflamació (mitjançant la reducció de l’àrea positiva F4/80 dels macròfags) i l’apoptosi (mitjançant la reducció dels nivells sèrics de citoquetatina-18). Per tant, l’administració d’una combinació bacteriana específica de composició definida pot millorar la EHNA, la HP i la fibrosi, i retardar la progressió de la malaltia. Finalment, desenvolupem un model de rata (denominat model FIBRO-SH) que va seguir una dieta alta en greixos, en colesterol i en glucosa i fructosa (HFHC/GF) durant 16 setmanes per a reproduir el fenotip complet de EHGNA amb fibrosi. La intervenció de la dieta HFHC/GF durant 16 setmanes va ser capaç d’induir un augment de l’activitat de EHNA amb una marcada fibrosi hepàtica, una HP significativa i disfunció endotelial promoguda per IR hepàtica. En conclusió, el model FIBRO-SH podria convertir-se en un model adequat per a la recerca bàsica de les fases avançades de la EHGNA i per a provar teràpies antifibròtiques en aquesta patologia. |
|---|