Effects of neuromuscular activity coupled to BDNF/TrkB signaling on the phosphorylation of the exocytotic proteins Munc18-1 and SNAP-25 through nPKCε and cPKCβI
A la sinapsis de la unió neuromuscular (NMJ), diverses vies de senyalització coordinen les respostes pre-/postsinàptiques i les cèl·lules glials associades. La relació entre aquestes vies modula les vesícules sinàptiques que regulen la neurotransmissió. A més, la PKC fosforila diverses molècules de...
| Autor: | |
|---|---|
| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2017 |
| País: | España |
| Institución: | CBUC, CESCA |
| Repositorio: | TDR. Tesis Doctorales en Red |
| OAI Identifier: | oai:www.tdx.cat:10803/460898 |
| Acceso en línea: | http://hdl.handle.net/10803/460898 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Unió neuromuscular Munc18-1 PKC Neuromuscular junction Ciències de la Salut 576 577 61 616.8 |
| Sumario: | A la sinapsis de la unió neuromuscular (NMJ), diverses vies de senyalització coordinen les respostes pre-/postsinàptiques i les cèl·lules glials associades. La relació entre aquestes vies modula les vesícules sinàptiques que regulen la neurotransmissió. A més, la PKC fosforila diverses molècules de l'aparell exocitòtic responsable d'aquesta regulació. Munc18-1 i SNAP-25 són substrats de PKC que juguen un paper clau en la maquinària exocitòtica. A més, la PKC està modulada per l'activitat pre-/postsinàptica al múscul esquelètic. No obstant això, encara es desconeix quines isoformes de PKC regulen aquestes molècules clau en la NMJ. cPKCβI i nPKCƐ es troben exclusivament en el terminal nerviós de la NMJ i estan regulades per l'activitat sinàptica. A més, la contracció muscular a través de BDNF/TrkB té un impacte important en aquestes isoformes. Amb tot, l’objectiu d’aquesta tesi és determinar l’expressió, localització i regulació pels activadors de PKC calci i èsters de forbol (PMA) de Munc18-1 i SNAP-25 i la seva fosforilació en el múscul esquelètic. A més, estudiar si aquestes fosforilacions estan afectades per (1) activitat sinàptica i contracció muscular per se; i (2) nPKCƐ, cPKCβI i la senyalització BDNF/TrkB de manera dependent d’activitat neuromuscular. Els principals resultats, obtinguts mitjançant anàlisi Western blot i microscòpia confocal, mostren que Munc18-1 i SNAP-25 s'expressen i fosforilen en condicions basals en el múscul esquelètic, predominantment a la fracció membrana, essent Munc18-1 localitzat al terminal nerviós. La fosforilació de Munc18-1 i SNAP-25 és modulada per calci, PMA, activitat sinàptica i és promoguda per nPKCƐ. D’altra banda, cPKCβI i la senyalització BDNF/TrkB regulen la fosforilació de Munc18-1 però no la de SNAP-25. Finalment, la contracció muscular regula negativament aquestes proteïnes per assolir un estat basal. En conclusió, aquests resultats proporcionen una visió mecànica de com Munc18-1 i SNAP-25 es regulen per aconseguir l'extraordinària precisió i plasticitat de la neurotransmissió. |
|---|