Coordinated effects of synaptic activity and muscle contraction on cpkc regulation by pdk1 and bdnf/trkb signalling. An approach towards the amyotrophic lateral sclerosis pathophysiology

El sistema neuromuscular és un complex circuit interconnectat en el qual les motoneurones presinàptiques i cèl·lules de Schwann indiquen al múscul esquelètic com créixer, diferenciar-se i funcionar. D’altra banda, el múscul proporciona senyals, incloent les neurotrofines, que regulen la supervivènci...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: Hurtado Caballero, Erica
Tipo de recurso: tesis doctoral
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2017
País:España
Institución:CBUC, CESCA
Repositorio:TDR. Tesis Doctorales en Red
OAI Identifier:oai:www.tdx.cat:10803/457136
Acceso en línea:http://hdl.handle.net/10803/457136
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:unió neuromuscular
BDNF
PKC
unión neuromuscular
neuromuscular junction
Ciències de la salut
576
577
61
616.8
Descripción
Sumario:El sistema neuromuscular és un complex circuit interconnectat en el qual les motoneurones presinàptiques i cèl·lules de Schwann indiquen al múscul esquelètic com créixer, diferenciar-se i funcionar. D’altra banda, el múscul proporciona senyals, incloent les neurotrofines, que regulen la supervivència i les funcions de les motoneurones. En concret, la neurotrofina BDNF regulada per activitat, a l’unir-se al TrkB, pot activar diferents vies incloent les PKCs. Per tant, és important conèixer com opera l’activitat pre- i post-sinàptica en condicions fisiològiques per controlar la funció neuromuscular a través de la regulació del BDNF i PKCs. Per estudiar això, es va estimular el nervi frènic del diafragma de rata amb o sense contracció, per tal de separar els efectes de l’activitat sinàptica i la contracció muscular. A continuació es van realitzar les tècniques ELISA, Western Blot, qRT-PCR, immunofluorescència i electrofisiologia. Els resultats van mostrar que tant l’activitat sinàptica com la contracció muscular regulen la maduració i l’activació de la cPKCβI d’una manera complexa i equilibrada a través de la PDK1 y del BDNF/TrkB. Això determinarà la funcionalitat de la sinapsi ja que els resultats també van mostrar que la cPKCβI potencia l’alliberament d’acetilcolina. No obstant, què ocorre en l’esclerosi lateral amiotròfica (ELA) on l’activitat neuromuscular disminueix? Podria l’exercici físic, incrementant l’activitat neuromuscular, prevenir els símptomes? Per abordar això, es van realitzar protocols d’entrenament basats en la natació i el running i es va analitzar la via del BDNF en el múscul plantaris de ratolins SOD1-G93A mitjançant Western Blot. Els resultats van mostrar que en l’ELA, la senyalització del BDNF està alterada però es pot prevenir aquesta afectació de manera diferent en funció de la natura i/o intensitat de l’exercici físic imposat. En conjunt, aquí es mostra un plantejament mecanicista del rol coordinat entre els components pre- i post-sinàptics per preservar la funció sinàptica.