Establecimiento de organoides de tumores gástricos a partir de biopsias endoscópicas de estómago y piezas de gastrectomía para el estudio de cáncer gástrico
[ES] El cáncer gástrico (CG) constituye la tercera causa de muerte por cáncer en todo el mundo. Actualmente, en la práctica clínica la elección del tratamiento en función de las alteraciones genéticas presentes en los pacientes (medicina personalizada) puede no resultar eficaz, debido a que a veces...
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| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Fecha de publicación: | 2019 |
| País: | España |
| Institución: | Universitat Politècnica de València (UPV) |
| Repositorio: | RiuNet. Repositorio Institucional de la Universitat Politécnica de Valéncia |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:riunet.upv.es:10251/130018 |
| Acceso en línea: | https://riunet.upv.es/handle/10251/130018 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Cáncer Gástrico Cultivos 3D Organoides Microambiente tumoral Gastric cancer 3D culture Organoids Tumor microenvironment MAQUINAS Y MOTORES TERMICOS Máster Universitario en Biotecnología Biomédica-Màster Universitari en Biotecnologia Biomèdica |
| Sumario: | [ES] El cáncer gástrico (CG) constituye la tercera causa de muerte por cáncer en todo el mundo. Actualmente, en la práctica clínica la elección del tratamiento en función de las alteraciones genéticas presentes en los pacientes (medicina personalizada) puede no resultar eficaz, debido a que a veces es complicado asociar la respuesta a determinados tratamientos con las alteraciones que presenta el tumor. Con el fin de abordar este hándicap, resulta esencial generar modelos experimentales que sean un reflejo del tumor del propio paciente. Las limitaciones de los sistemas convencionales han dado paso a una nueva tecnología basada en organoides. Esta nueva tecnología permite generar, a partir de la biopsia de un paciente, organoides tanto de tejido tumoral como de normal paciente-específicos. Sabiendo que los organoides resultan un modelo experimental prometedor capaz de mantener el fenotipo, el perfil genético y las funciones propias de los tumores humanos de forma personalizada, resulta clave definir la metodología asociada a su correcta generación, la cual varía según el tipo de tumor. En concreto, para la generación de organoides de tejido gástrico tumoral encontramos en la bibliografía procedimientos muy diversos, por tanto, se requiere establecer una metodología para su correcta y eficiente generación, así como verificar que tanto molecular como morfológicamente son un reflejo del tejido tumoral del paciente. Otro de los puntos de interés es el estudio del microambiente tumoral ya que parece claro que juega un papel clave en la progresión tumoral y en la respuesta a tratamiento. Por ello se ha abordado la puesta a punto del análisis por citometría de los diferentes tipos celulares que componen el tejido tumoral. En el presente trabajo se ha conseguido la puesta a punto del establecimiento eficiente de cultivos de organoides a partir de tejido gástrico tumoral y normal pareados, que era el objetivo principal planteado, con una tasa de éxito del 77%. Se han definido, además, diferentes parámetros como el tiempo de digestión enzimática del tejido, densidad celular óptima a plaquear en el Matrigel y concentración de Matrigel adecuada. Por otro lado, los resultados de secuenciación muestran que los organoides establecidos recapitulan en un 98% el perfil genético del tejido tumoral del cual proceden. Además, se ha puesto a punto el protocolo adecuado para el análisis morfológico de los organoides mediante histoquímica y la caracterización del tejido tumoral mediante citometría de flujo, la cual indica la presencia de diferentes poblaciones celulares (células linfocitarias y macrófagos infiltrados) y marcadores tumorales. Finalmente, todo ello ha permitido crear una organoidoteca de cáncer gástrico de interés para la comunidad científica. |
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