| Sumario: | La enfermedad de Parkinson es la segunda enfermedad neurodegenerativa y el trastorno del movimiento más común. Los síntomas cardinales -bradicinesia, rigidez y temblor de reposo- permiten su diagnóstico clínico. Sin embargo, otros síntomas de tipo no motor han adquirido gran relevancia clínica incluyéndose como red-flags de la enfermedad. Algunos, como la hiposmia, preceden por décadas la manifestación clínica, otros, como la ansiedad, la depresión o la demencia, son incluso más incapacitantes que los síntomas motores. Los cuerpos de Lewy, agregados de la proteína patológica -sinucleína, caracterizan neuropatológicamente la enfermedad siguiendo un patrón predecible de 6 estadios neuropatológicos (estadios de Braak) que parecen concordar con la sintomatología clínica y con la hipótesis prionoide, según la cual la -sinucleína se disemina en las diferentes áreas cerebrales a través de las conexiones sinápticas. El núcleo olfativo anterior se afecta desde el estadio de Braak 1, lo cual se ha relacionado con la hiposmia. La patología alcanza el complejo amigdalino en el estadio 3, provocando ansiedad y depresión. En el estadio de Braak 4 se afecta el hipocampo, causando deterioro cognitivo y demencia. La -sinucleinopatía en estas áreas cerebrales podría causar neurodegeneración, microgliosis y/o astrogliosis, lo cual es susceptible de provocar cambios volumétricos útiles como biomarcadores de imagen; de igual modo, podría causar alteraciones en la expresión de proteínas, que podrían ser utilizadas como biomarcadores moleculares. En la presente Tesis Doctoral se usan técnicas estereológicas como el fraccionador de la fracción de área, para calcular el área ocupada por la -sinucleína; el fraccionador óptico, para estimar la densidad de las poblaciones celulares y de los cuerpos de Lewy; y el método de Cavalieri, para analizar el volumen de las porciones del núcleo olfativo anterior, la amígdala y el hipocampo humano con y sin enfermedad de Parkinson. Además, se realizaron los primeros estudios de proteómica líquida en el complejo amigdalino y el hipocampo empleando los métodos SWATH-MS y día-PASEF, respectivamente. Los resultados mostraron una -sinucleinopatía más acusada en la porción bulbar del núcleo olfativo anterior, su distribución en el complejo amigdalino fue homogénea y en el hipocampo afectó especialmente al cornus ammonis 2. No se observaron alteraciones ni en el volumen, ni en la densidad de las poblaciones celulares estudiadas de las porciones del núcleo olfativo anterior, los grupos nucleares del complejo amigdalino y los subcampos del hipocampo. A nivel proteómico la afectación fue clara, 199 proteínas se expresaron diferencialmente en el complejo amigdalino con enfermedad de Parkinson y 83 en el hipocampo. Destacó el daño de proteínas relacionadas estructural y/o funcionalmente con las sinapsis. Se validaron por su potencial importancia en la enfermedad 5 proteínas up-reguladas (GNAI1, EEF1A1, PLP1, NPTN y YWHAH) y 2 down-reguladas (GRIM19 y ORM2) en el complejo amigdalino con enfermedad de Parkinson y 4 proteínas up-reguladas (CTND2, SNTA1, AHA-1 y PHYHIPL) y 3 down-reguladas (CASKI1, REEP2 y TMEM163) en el hipocampo. En base a estos resultados, se concluyó que el daño provocado por la acumulación de -sinucleína en forma de patología de Lewy no es suficiente para alterar la densidad neuronal, microglial y astroglial del núcleo olfativo anterior, el complejo amigdalino y el hipocampo humanos. Sin embargo, el daño a nivel proteómico evidencia un deterioro sináptico importante. Esta inferencia conduce a proponer futuras investigaciones centradas en el estudio estereológico y proteómico de la sinapsis en tejido neurológico humano con enfermedad de Parkinson.
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