Paper de la proteïna p27 en la regulació de l'expressió de l'α-sinucleïna: Implicacions en la malaltia de Parkinson

[cat] El nostre grup ha identificat prèviament diferents gens i programes transcripcionals regulats per la proteïna p27. En aquest treball ens centrem en el paper de la proteïna p27 en la regulació a nivell transcripcional de l’expressió del gen que codifica per l’α-sinucleïna (gen SNCA), una proteï...

ver descrição completa

Detalhes bibliográficos
Autor: Domuro Soriano, Carla
Formato: tesis doctoral
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2019
País:España
Recursos:Universidad de Barcelona
Repositorio:Dipòsit Digital de la UB
OAI Identifier:oai:diposit.ub.edu:2445/165292
Acesso em linha:https://hdl.handle.net/2445/165292
http://hdl.handle.net/10803/669150
Access Level:acceso abierto
Palavra-chave:Malalties neurodegeneratives
Malaltia de Parkinson
Alfa-sinucleïna
Neurodegenerative Diseases
Parkinson's disease
Alpha-synuclein
Descrição
Resumo:[cat] El nostre grup ha identificat prèviament diferents gens i programes transcripcionals regulats per la proteïna p27. En aquest treball ens centrem en el paper de la proteïna p27 en la regulació a nivell transcripcional de l’expressió del gen que codifica per l’α-sinucleïna (gen SNCA), una proteïna molt important en el desenvolupament de la malaltia de Parkinson. Específicament, l’α-sinucleïna forma agregats en regions concretes del cervell. En aquest treball hem comprovat que les cèl·lules deficients de p27 presenten nivells més elevats d’α-sinucleïna. Per altra banda, en cervells de ratolins KO de p27 també observem un augment de l’expressió d’α-sinucleïna. Addicionalment, mitjançant la tècnica de silenciament gènic CRISPR/Cas9 vam obtenir línies cèl·lules KO de p27 i E2F4 i en aquestes cèl·lules també s’observa un augment de l’α-sinucleïna. Posteriorment, hem descrit, mitjançant experiments de ChIP i de luciferases, la regulació a nivell transcripcional de p27 del gen SNCA en associació a diferents factors de transcripció, C/EBPδ i E2F4/p130. En ambdós casos l’expressió de p27 reprimeix l’expressió del gen SNCA. A més a més, mitjançant shRNAs i la tècnica de Proximity Ligation Assay (PLA) hem observat com la disminució dels nivells de p27 i p130 també augmenten l’agregació de l’α-sinucleïna. També hem identificat CDK5 com una possible quinasa encarregada de fosforil·lar a p27 i exportar-ho al citoplasma on no pot exercir la seva funció com a regulador transcripcional. Finalment, mitjançant shRNAs vam disminuir els nivells de CDK5, en aquestes cèl·lules i amb la tècnica de PLA hem aconseguit veure com la supressió de CDK5 provoca un augment en l’agregació de l’α-sinucleïna. Com està descrit que CDK5 és capaç d’interaccionar amb els complexes E2F1/pRB, hem caracteritzat la unió de p27 a E2F1 mitjançant columnes cromatogràfiques i hem establert que E2F1 s’uneix a al extrem final de p27, entre els aminoàcids 160-198, de manera similar a la que s’uneix amb E2F4.

Registos relacionados