Efectos de nuevos diluyentes y de la temperatura en la calidad espermática de anguila (Anguilla anguilla)
[ES] Tanto la criopreservación como el almacenamiento en frío del esperma de peces son métodos esenciales para los programas de reproducción asistida y conservación de especies que se encuentran en peligro crítico de extinción, como en este caso la anguila europea (Anguilla anguilla). Su calidad esp...
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| Format: | master thesis |
| Publication Date: | 2025 |
| Country: | España |
| Institution: | Universitat Politècnica de València (UPV) |
| Repository: | RiuNet. Repositorio Institucional de la Universitat Politécnica de Valéncia |
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Efectos de nuevos diluyentes y de la temperatura en la calidad espermática de anguila (Anguilla anguilla) Effects of New Diluents and Temperature on the Sperm Quality of the Eel (Anguilla anguilla) Efecte de nous diluents i la temperatura en la qualitat de l&apos esperma d&apos anguila (Anguilla anguilla) |
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Efectos de nuevos diluyentes y de la temperatura en la calidad espermática de anguila (Anguilla anguilla) |
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Efectos de nuevos diluyentes y de la temperatura en la calidad espermática de anguila (Anguilla anguilla) Rodriguez Garcia, Erika Conservación Incubación Motilidad Reproducción asistida Conservation Assisted reproduction Anguila europea (Anguilla anguilla) Máster Universitario en Acuicultura-Màster Universitari en Aqüicultura |
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Conservación Incubación Motilidad Reproducción asistida Conservation Assisted reproduction Anguila europea (Anguilla anguilla) Máster Universitario en Acuicultura-Màster Universitari en Aqüicultura |
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Conservación Incubación Motilidad Reproducción asistida Conservation Assisted reproduction Anguila europea (Anguilla anguilla) Máster Universitario en Acuicultura-Màster Universitari en Aqüicultura |
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[ES] Tanto la criopreservación como el almacenamiento en frío del esperma de peces son métodos esenciales para los programas de reproducción asistida y conservación de especies que se encuentran en peligro crítico de extinción, como en este caso la anguila europea (Anguilla anguilla). Su calidad espermática empeora rápidamente tras la extracción, por lo que las condiciones de incubación y activación y la elección del diluyente son factores clave para mantenerla. El diluyente P1 es el usado desde hace más de 20 años para preservar el esperma de anguila, y se basa en las concentraciones de iones del plasma seminal de la especie. Sin embargo, más adelante se midió la concentración intracelular de Na+ en el esperma de anguila y se vio que era más bajo que el empleado en el P1, de 100 mM, por lo que se diseñó un nuevo extendar con esta composición en Na+. Se emplearon muestras de esperma de machos adultos de anguilas que recibieron una dosis hormonal semanal de rhCG (1,5 UI/g pez), y que se recolectaron a partir de la semana 15 de tratamiento hormonal. El diseño experimental se basó en tres ensayos: 1) comparación entre diluyentes P1 y P2, con diferentes concentraciones de Na+ y de tampón pH TAPS; 2) comparación entre P1, P1+TAPS (con igual composición que P1, pero con 10 mM TAPS) y P2; y 3) análisis de las muestras espermáticas diluidas en P1 con una motilidad superior al 50%, comparando entre dos temperaturas de incubación y activación (4 ºC y 20 ºC). Las evaluaciones se realizaron mediante un sistema CASA (Computer-Assisted Sperm Analysis), y en los tres experimentos se evaluaron motilidad total, motilidad progresiva, velocidad curvilínea, velocidad promedia de desplazamiento y velocidad en línea recta. Los resultados mostraron una motilidad significativamente mayor en las muestras diluidas con P2 respecto a los otros dos diluyentes empleados. La adición de TAPS al P1 no mejoró de manera significativa la calidad espermática frente a P2, pero presentó una mejora respecto a P1, permitiendo evaluar el efecto de adicionar el tampón. En cuanto a las temperaturas de incubación y activación, se observó un efecto significativo, destacando valores significativamente más altos en las muestras incubadas a 4 ºC frente a las incubadas a 20 ºC. Se concluye que el uso del diluyente P2 es más recomendable para el almacenamiento de las muestras de anguila europea, y que la incubación y activación a 4 ºC favorece la conservación de su calidad espermática. |
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El diluyente P1 es el usado desde hace más de 20 años para preservar el esperma de anguila, y se basa en las concentraciones de iones del plasma seminal de la especie. Sin embargo, más adelante se midió la concentración intracelular de Na+ en el esperma de anguila y se vio que era más bajo que el empleado en el P1, de 100 mM, por lo que se diseñó un nuevo extendar con esta composición en Na+. Se emplearon muestras de esperma de machos adultos de anguilas que recibieron una dosis hormonal semanal de rhCG (1,5 UI/g pez), y que se recolectaron a partir de la semana 15 de tratamiento hormonal. El diseño experimental se basó en tres ensayos: 1) comparación entre diluyentes P1 y P2, con diferentes concentraciones de Na+ y de tampón pH TAPS; 2) comparación entre P1, P1+TAPS (con igual composición que P1, pero con 10 mM TAPS) y P2; y 3) análisis de las muestras espermáticas diluidas en P1 con una motilidad superior al 50%, comparando entre dos temperaturas de incubación y activación (4 ºC y 20 ºC). Las evaluaciones se realizaron mediante un sistema CASA (Computer-Assisted Sperm Analysis), y en los tres experimentos se evaluaron motilidad total, motilidad progresiva, velocidad curvilínea, velocidad promedia de desplazamiento y velocidad en línea recta. Los resultados mostraron una motilidad significativamente mayor en las muestras diluidas con P2 respecto a los otros dos diluyentes empleados. La adición de TAPS al P1 no mejoró de manera significativa la calidad espermática frente a P2, pero presentó una mejora respecto a P1, permitiendo evaluar el efecto de adicionar el tampón. En cuanto a las temperaturas de incubación y activación, se observó un efecto significativo, destacando valores significativamente más altos en las muestras incubadas a 4 ºC frente a las incubadas a 20 ºC. Se concluye que el uso del diluyente P2 es más recomendable para el almacenamiento de las muestras de anguila europea, y que la incubación y activación a 4 ºC favorece la conservación de su calidad espermática.[EN] Both cryopreservation and cold storage of fish sperm are essential methods for assisted reproduction programs and for the conservation of species that are critically endangered, such as the European eel (Anguilla anguilla). Sperm quality deteriorates rapidly after extraction; therefore, incubation and activation conditions, as well as the choice of extender, are key factors for its preservation. Extender P1 has been used for more than 20 years to preserve eel sperm, and it was formulated based on the ion concentrations of the species seminal plasma. However, subsequent measurements of intracellular Na+ concentration in eel sperm showed that it was lower than the 100 mM used in P1, leading to the development of a new extender with this adjusted Na+ concentration. Sperm samples were obtained from adult male eels that received a weekly hormonal dose of rhCG (1,5 IU/g fish), and collections started from week 15 of hormonal treatment. The experimental design was based on three assays: (1) comparison between extenders P1 and P2, with different Na+ concentrations and pH buffer TAPS; (2) comparison between P1, P1+TAPS (with the same composition as P1 but with 10 mM TAPS), and P2; and (3) analysis of sperm samples diluted in P1 with motility above 50%, comparing two incubation and activation temperatures (4 °C and 20 °C). Evaluations were carried out using a CASA system (Computer-Assisted Sperm Analysis), and in all three experiments, total motility, progressive motility, curvilinear velocity, average path velocity, and straight-line velocity were assessed. The results showed significantly higher motility in samples diluted with P2 compared to the other extenders. The addition of TAPS to P1 did not significantly improve sperm quality compared to P2, but it did show an improvement over P1, allowing the effect of buffer addition to be evaluated. Regarding incubation and activation temperatures, a significant effect was observed, with significantly higher values in samples incubated at 4 °C compared to those incubated at 20 °C. It is concluded that the use of extender P2 is more suitable for the storage of European eel sperm samples, and that incubation and activation at 4 °C favors the preservation of sperm quality.Universitat Politècnica de ValènciaAsturiano Nemesio, Juan Franciscode Souza França, ThalesDepartamento de Ciencia AnimalInstituto Universitario de Ciencia y Tecnología AnimalEscuela Técnica Superior de Ingeniería Agronómica y del Medio NaturalRepositorio Institucional de la Universitat Politècnica de València Riunet20252025-10-0620252025-09-19master thesishttp://purl.org/coar/resource_type/c_bdccinfo:eu-repo/semantics/masterThesisapplication/pdfhttps://riunet.upv.es/handle/10251/227643reponame:RiuNet. 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