Application of dna binding protein tags as means for defined co-immobilization in biosensors

L’objectiu d’aquesta tesi doctoral és explorar la utilització de proteïnes d’unió al ADN en la generació i amplificació de senyal en biosensors. L’alta especificitat i afinitat d’aquestes proteïnes per les seves respectives seqüencies específiques de ADN de doble cadena (ADNdc) ha sigut utilitzada p...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: Aktas, Gülsen Betül
Tipo de recurso: tesis doctoral
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2017
País:España
Institución:CBUC, CESCA
Repositorio:TDR. Tesis Doctorales en Red
OAI Identifier:oai:www.tdx.cat:10803/458372
Acceso en línea:http://hdl.handle.net/10803/458372
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:Biosensor
Proteïnes d’unió al ADN
Enginyeria de proteïnes
Proteínas de unión al ADN
Ingeniería de proteínas
DNA binding proteins
Protein Engineering
Ciències
543
577
6
66
Descripción
Sumario:L’objectiu d’aquesta tesi doctoral és explorar la utilització de proteïnes d’unió al ADN en la generació i amplificació de senyal en biosensors. L’alta especificitat i afinitat d’aquestes proteïnes per les seves respectives seqüencies específiques de ADN de doble cadena (ADNdc) ha sigut utilitzada per desenvolupar un sistema d’immobilització que permet la co-immobilització de forma controlada de múltiples proteïnes. El sistema proposat està basat en la utilització d’aquestes proteïnes d’unió al ADN com a etiquetes de fusió de les proteïnes a immobilitzar i amb l’ús conjunt d’una molècula de ADNdc que fa la funció de plantilla per a la co-immobilització degut al posicionament de les seqüències de ADN que reconeixen específicament aquestes proteïnes d’unió al ADN. Aquest treball descriu la preparació i caracterització de dos conjugats universals d’enzim-proteïna d’unió al ADN i demostra el seu ús en la generació i amplificació de senyal en biosensors per a la detecció d’àcids nucleics i proteïnes. A més, també es mostra la idoneïtat d’aquestes proteïnes d’unió al ADN per immobilitzar directament molècules de ADN.