Estudi de la significació cel·lular dels "lípids mòbils" visibles per RMN en cèl·lules C6 de glioma de rata
Els lípids mòbils visibles per RMN (ML) ressonant a 1,28 i 0,9ppm han estat descrit en el patró espectral de tumors cerebrals agressius I en diversos tipus cel·lulars en cultiu. Els ML provenen principalment de triacilglicerols (TAG) continguts en gotícules lipídiques (1-10 ?diàmetre) i han estat re...
| Autor: | |
|---|---|
| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2007 |
| País: | España |
| Institución: | CBUC, CESCA |
| Repositorio: | TDR. Tesis Doctorales en Red |
| OAI Identifier: | oai:www.tdx.cat:10803/3563 |
| Acceso en línea: | http://www.tdx.cat/TDX-0412107-154601 http://hdl.handle.net/10803/3563 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | RMN Lípids mòbils Tumors cerebrals Ciències Experimentals 577 |
| Sumario: | Els lípids mòbils visibles per RMN (ML) ressonant a 1,28 i 0,9ppm han estat descrit en el patró espectral de tumors cerebrals agressius I en diversos tipus cel·lulars en cultiu. Els ML provenen principalment de triacilglicerols (TAG) continguts en gotícules lipídiques (1-10 ?diàmetre) i han estat relacionats a necrosi i hipòxia en tumors, i a la velocitat de proliferació en cultius cel·lulars. Entendre l'origen bioquímic I biofísic dels ML pot ser ajuda a la MRS de tumors cerebrals humans en el diagnòstic, pronòstic i planificació de la teràpia.<br/>Els senyals de lípids visibles per RMN (ML) de les cèl·lules C6 han estat monitorats a 9,4 i 11,7 T (pols i adquisició i 136 ms temps d'eco) en sediments cel·lulars per espectroscòpia de 1H NMR. S'ha trobat un comportament reproduïble amb el creixement. Els ML augmenten de fase log (dia 4 de cultiu) a fase postconfluent (dia 7 de cultiu). Aquest comportament es correspon amb el percentatge de cèl·lules que contenent gotícules citosòliques detectables per tinció amb Nile Red i epifluorescència. (rang 23% -60% de cèl·lules). El nombre de cèl·lules positives augmenta després de la sembra (dia 0-1), disminueix a fase log (dia 2-4), augmenta altre cop amb la confluència (dia 5) i encara més en post-confluència (dia 7). L'aturada de la proliferació induïda per deprivació de factors de creixement indueix una major acumulació de gotícules citosòliques (fins a 100%) i un major augment en els ML ( fins a 21 vegades respecte de les cèl·lules de fase log de dia 4 de cultiu).<br/>La quantificació del lípids neutres en extractes lipídics totals de cèl·lules C6 per cromatografia en capa prima (TLC) mostra que no hi ha canvis significatius amb el creixement o l'aturada de proliferació en els principals tipus de lípids neutres presents (triacilglicerols, TAG; diacilglicerols, DAG; esters de colesterol, ChoEst) excepte pels DAG, els quals decreixen en cèl·lules de dia 7.<br/>La quantificació per 1H-13C HMQC dels extractes de cèl·lules C6 (cèls. dia 4, fase log, n=3; i dia 7, post-confluenst, n=3) i and {1}-13C-glucosa enriquida 99% (cèls. dia 4, , n=3, incubació 2h4; i dia 7, n=3, incubació 48h) va mostrar que no hi havia diferències significatives en el contingut de TEG entre cèl·lules de dia 4 i de dia 7. La distribució del marcatge obtinguda suggereix una compartimentalització de la síntesi de PL i TAG a partir de DAG, i un origen diferent de glucosa per la síntesi de TAG en les condicions experimentals.<br/>L' aparent discrepància entre els resultants d'RMN, microscòpia òptica I TLC pot ser explicada si es tenen en compte canvis biofísics en el pool de lípids neutres i els resultants de marcatge. Es proporciona una explicació cel·lular pels resultats obtinguts: la hipòtesi de la llançadora de TAG. |
|---|