Papel de la enzima convertidora de endotelina-1c (ECE-1c) en tumorigenesis y metástasis de células de cáncer de colon

La enzima convertidora de Endotelina-1c (ECE-1c) es una metaloproteasa de zinc y participa en la síntesis de ET-1 (ET-1). En diversos tipos de cáncer, ET-1 promueve propiedades mitogénicas, promoviendo proliferación e invasión celular. Adicionalmente, ECE-1c se ha descrito como un mediador de la inv...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: Huerta Castro, Hernán Huerta
Tipo de recurso: tesis doctoral
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2018
País:Chile
OAI Identifier:oai:repositorio.anid.cl:10533/236579
Acceso en línea:https://hdl.handle.net/10533/236579
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:Ciencias Naturales
Ciencias de la Tierra y del Medio Ambiente
Biología Celular
Descripción
Sumario:La enzima convertidora de Endotelina-1c (ECE-1c) es una metaloproteasa de zinc y participa en la síntesis de ET-1 (ET-1). En diversos tipos de cáncer, ET-1 promueve propiedades mitogénicas, promoviendo proliferación e invasión celular. Adicionalmente, ECE-1c se ha descrito como un mediador de la invasividad del cáncer, sin embargo se desconoce si este proceso es dependiente de los niveles de ET-1. En base a esto decidimos estudiar el rol de ECE-1c y su dependencia con ET-1, en el desarrollo de características malignas en células de cáncer de colon. La proteína ECE-1c fue sobreexpresada en células DLD-1 mediante transfección lentiviral y esto fue confirmado mediante western blot y ELISA midiendo los niveles de ET-1. La viabilidad, migración en invasión celular fue evaluada mediante ensayos de MTS, transwell y matrigel respectivamente. La activación de las kinasas Akt y FAK fue evaluada mediante western blot. El crecimiento tumoral en vivo fue evaluado mediante inyección subcutánea de células tumorales en ratones NOD/SCID. ECE-1c aumentó la activación de Akt y FAK correlacionando con una aumentada proliferación, migración e invasión. Las células que sobreexpresan ECE-1c mostraron una resistencia al tratamiento con 5-Fluorouracilo en comparación al control. Interesante el bloqueo del receptor de ET-1 mediante BQ-123 no mostró un efecto significativo en los parámetros evaluados, sugiriendo que los efectos de ECE-1c no son mediados exclusivamente por los niveles de ET-1, sino que podría existir un mecanismo no canónico. El crecimiento tumoral in vivo fue significativamente mayor en las células que sobreexpresan ECE-1c. ECE-1c promueve características malignas en células de cáncer de colon in vitro e in vivo. Nuestros resultados sugieren un mecanismo independiente de ET-1 por el cual ECE-1c promueve una mayor viabilidad y migración celular.