Association of progranulin expression in dyspeptic patients with virulence of Helicobacter pylori strains. in vivo model. Asociación de la expresión de progranulina de pacientes dispépticos con la virulencia de las cepas de Helicobacter pylori. Modelo in vivo.
Background: Helicobacter pylori is a bacteria considered a grade 1 carcinogen due to its close association with gastric cancer. Gastric cancer is prevalent worldwide, and in Chile, it has a high mortality rate, mainly due to late diagnosis, highlighting the Region of La Araucanía among the most affe...
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2022 |
| País: | Chile |
| OAI Identifier: | oai:repositorio.anid.cl:10533/42659 |
| Acceso en línea: | https://hdl.handle.net/10533/42659 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Medicina y Ciencias de la Salud Otras Ciencias Médicas |
| Sumario: | Background: Helicobacter pylori is a bacteria considered a grade 1 carcinogen due to its close association with gastric cancer. Gastric cancer is prevalent worldwide, and in Chile, it has a high mortality rate, mainly due to late diagnosis, highlighting the Region of La Araucanía among the most affected. Progranulin (PGRN) is an anti-inflammatory protein associated with a poor prognosis in neoplastic processes such as hepatocellular, ovarian, bladder cancer, and glioblastoma; however, there have been few studies on gastritis and gastric cancer. To find in PGRN a tool that allows early detection of H. pylori. associated disease progression, it proposed to relate pgrn expression levels to the status of gastric tissue and the virulence of colonizing strains in dyspeptic patients. Methodology: The ethics committee previously approved this research. 150 dyspeptic patients took care of at three health centers, two public and one private, all from the La Araucanía Region, Chile, they voluntarily agreed to participate in the study, signed informed consent, and were surveyed for the sociodemographic records. Through endoscopy procedure, three antral gastric biopsies were obtained from patients, one for the rapid urease test, another for bacterial culture in Columbia Blood 7% medium, supplemented with antibiotics (DENT 2% OXOIDTM) and a microaerophilic environment at 37°C to obtain H. pylori species, confirmed by Gram stain, catalase, and oxidase test, and genetic validation by the ureC gene, including detection of the vacA, cagA, and iceA genes, by conventional PCR. A total of 75 samples made up the case group (infected), and 75 biopsies not colonized by H. pylori made up the control group. From the third biopsy, the relative expression levels of PGRN were determined by q-PCR. Through endoscopy procedure simultaneously recorded esophagus, stomach, and duodenum abnormality (gastritis, ulceration, erosion, and others). Results: According to the endoscopic observation report, 94 (62.67%) tissues without lesions (SL), 35 (23.33%) erosive lesions (LE), 13 (8.67%) non-erosive lesions (LNE) were detected. 6 (4%) atrophic (LAt) and 2 (1.33%) advanced (LAv) type metaplasia. Lower levels of PGRN expression were detected in the infected tissue, with similar levels in tissues without lesions (SL) or with erosive lesions (LE), these decrease according to the advance in the precancerous cascade of Correa, reaching lower levels in the tissue non-erosive and drops significantly in atrophic lesions (LAt). Those strains of greater virulence persist in all status of lesion progression including the most advanced (LAv), specifically, VacAs1m1+CagA+IceA1+, LAv (n=1, 100%), and VacAs1m1+CagA+IceA2+ isolated from atrophic lesions LAt, (n=2, 66.67%). Conclusions: PGRN gene expression is modified depending on the infected or non-infected status of the gastric tissue. In infected patients, a decrease in expression observed under the advance in the precancerous cascade, reaching a significant reduction in premalignant lesions, which reaches significant levels in atrophic lesions, coinciding with tissues that present more virulent genotypes such as VacAs1m1+, included IceA+. The virulence of H. pylori affects the behavior of PGRN during gastric inflammation, limiting the gene expression and functionality of PGRN, which may favor progression towards precancerous lesions and cancer. Antecedentes: Helicobacter pylori es una bacteria considerada un cancerígeno grado 1 por su estrecha asociación con cáncer gástrico. El cáncer gástrico es prevalente a nivel mundial y en Chile tiene una alta mortalidad, debido principalmente a lo tardío del diagnóstico, destacando la Región de La Araucanía entre las más afectadas. La progranulina (PGRN) es una proteína antinflamatoria asociada a mal pronóstico en procesos neoplásicos como cáncer hepatocelular, ovarios, vejiga y glioblastoma, sin embargo, ha sido poco estudiada en gastritis y cáncer gástrico. Con el objetivo de encontrar en la PGRN una herramienta que permita detectar precozmente la progresión de la enfermedad asociada a H. pylori, se propuso relacionar los niveles de expresión de pgrn con el estado del tejido gástrico y la virulencia de las cepas colonizantes en pacientes dispépticos. Metodología: Se estudió el tejido gástrico de 150 pacientes dispépticos atendidos dos centros de salud públicos y uno privado de la Región de La Araucanía, quienes accedieron voluntariamente a participar del estudio, firmaron consentimiento informado y reportaron por medio de una encuesta antecedentes sociodemográficos. Por el proceso endoscópico, se obtuvieron tres muestras de biopsia, una para la prueba de ureasa, otra para cultivo bacteriano en medio Columbia, más Sangre 7% y antibióticos (DENT 2% OXOIDTM), en ambiente microaerófilo a 37°C para obtención de las especies H. pylori, confirmadas según tinción de Gram, test de catalasa y oxidasa, y validación genética por el gen ureC, incluidos la detección de los genes vacA, cagA e iceA, por PCR convencional. En total 75 muestras conformaron el grupo casos y 75 biopsias no colonizadas por H. pylori conformaron el grupo control. A partir de la tercera biopsia se determinaron los niveles de expresión relativa de PGRN por q-PCR. Resultados: Según el reporte de la observación endoscópica se detectaron 94 (62,67%) tejidos sin lesiones (SL), 35 (23,33%) lesiones erosivas (LE), 13 (8,67%) lesiones no erosivas (LNE), 6 (4%) atróficas (LAt) y 2 (1,33%) avanzadas (LAv) tipo metaplasia. Se detectaron menores niveles de expresión de PGRN en el tejido infectado, con niveles similares en tejidos sin lesiones (SL) o con lesiones erosivas (LE), estos disminuyen según el avance en la cascada precancerosa de Correa, se reduce en el tejido no erosivo y cae de forma importante en lesiones atróficas (LAt). Las cepas más virulentas persisten en todas las etapas de progresión de lesiones incluidas las más avanzadas (LAv). VacAs1m1+CagA+IceA1+, (n=1, 100%) y VacAs1m1+CagA+IceA2+ aisladas de lesiones atróficas (LAt, n=2, 66,67%) Conclusión: La expresión génica de PGRN se modifica en el estado infectado del tejido gástrico. Se aprecia disminución de la expresión acorde con el avance en la cascada precancerosa, alcanzando una significativa reducción en lesiones premalignas, de tipo atróficas, coincidente con tejidos que presentan genotipos más virulentos como es VacAs1m1+, incluido IceA+. La virulencia de H. pylori afecta la respuesta de PGRN frente a la inflamación gástrica, limitando la expresión génica y la funcionalidad de PGRN, lo que puede favorecer la progresión hacia lesiones precancerosas y cáncer. |
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