Comparativos de germline de anticorpos monoclonais antitetânicos: Mutações e impactos na afinidade com antígeno.

Os anticorpos monoclonais são amplamente utilizados na clínica de diversas doenças complexas, tendo um bom potencial também em doenças infecciosas como o Tétano. O tétano é uma doença letal causada pela infecção causada pela neurotoxina tetânica (TeNT), composta por unidades diretamente ligadas à su...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: Barreiros, Gabriela Massaro
Tipo de recurso: tesis de maestría
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2024
País:Brasil
Institución:Universidade de São Paulo (USP)
Repositorio:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
Idioma:portugués
OAI Identifier:oai:teses.usp.br:tde-23102025-150518
Acceso en línea:https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-23102025-150518/
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:Docking Molecular
Anticorpos Monoclonais
Epitope Prediction
In Silico Method
Método In Silico
Molecular Docking
Monoclonal Antibodies
Predição de Epítopos
Tétano
Tetanus
Descripción
Sumario:Os anticorpos monoclonais são amplamente utilizados na clínica de diversas doenças complexas, tendo um bom potencial também em doenças infecciosas como o Tétano. O tétano é uma doença letal causada pela infecção causada pela neurotoxina tetânica (TeNT), composta por unidades diretamente ligadas à sua ação neurotóxica. O conhecimento da estrutura dos antígenos permite avaliar e selecionar anticorpos monoclonais com maior potencial de neutralização, sendo que os métodos in silico podem apresentar um papel importante nesta avaliação. Este trabalho teve como objetivo avaliar três anticorpos monoclonais antitetânicos obtidos em trabalhos anteriores, através de métodos in silico, para a avaliação das mutações em relação às sequências germlines, e para a predição dos parátopos e epítopos com o objetivo de avaliar os possíveis impactos das mutações na afinidade ao antígeno. A pesquisa germline foi realizada com informações das plataformas IgBlast e absYs. A predição dos parátopos e epítopos foi realizada pelo método de Docking Molecular, através das plataformas HADDOCK 2.4 e SnugDock. A pesquisa mostrou que a diferença na interação dos mAbs com o antígeno pode ser devida a mutações no gene V da germline e inserções na região de ligação VDJ, resultando em sequências diferentes para a CDR3 da cadeia pesada. A análise dos parátopos e epítopos revelou que, apesar de uma quantidade semelhante de resíduos dos parátopos entre os mAbs e suas germlines, a composição diferente resultou em epítopos localizados em diferentes regiões de TeNT. Importante observar que os resíduos das sequências germlines interagem principalmente via ligações de hidrogênio, com maior força de interação. Nos ensaios de docking, os melhores resultados foram obtidos com a sinalização dos resíduos ativos na plataforma HADDOCK. Apesar das concordâncias dos ensaios in silico e dos ensaios in vitro, as ferramentas in silico devem ser complementares aos métodos existentes para a triagem na obtenção de anticorpos monoclonais.