Atividade sinérgica do antidepressivo sertralina associada a caspofungina contra Trichophyton rubrum e avaliação dos mecanismos de resposta adaptativa

As infecções fúngicas em humanos têm aumentado em incidência, principalmente em imunocomprometidos. Trichophyton rubrum é o fungo mais prevalente nas dermatofitoses. As condições climáticas, fatores culturais, padrões de migração populacional e até mesmo o nível socioeconômico da população são algum...

Full description

Bibliographic Details
Author: Rocha, Carlos Henrique Lopes
Format: doctoral thesis
Status:Published version
Publication Date:2023
Country:Brasil
Institution:Universidade de São Paulo (USP)
Repository:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da USP
Language:Portuguese
OAI Identifier:oai:teses.usp.br:tde-26022024-094330
Online Access:https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17135/tde-26022024-094330/
Access Level:Open access
Keyword:Trichophyton rubrum
Antifungal resistance
Biofilm
Biofilme
Caspofungin
Caspofungina
Dermatófito
Dermatophyte
Resistência antifúngica
Sertralina
Sertraline
Sinergismo
Synergism
Description
Summary:As infecções fúngicas em humanos têm aumentado em incidência, principalmente em imunocomprometidos. Trichophyton rubrum é o fungo mais prevalente nas dermatofitoses. As condições climáticas, fatores culturais, padrões de migração populacional e até mesmo o nível socioeconômico da população são algumas características que determinam o desenvolvimento de infecções causadas por dermatófitos. Para tratamentos dessas infecções existem poucas opções terapêuticas que atuam em alvos celulares limitados. Além disso, os fungos desenvolvem mecanismos para resistir ao estresse causado pelos antifúngicos disponíveis. Dessa forma, novas estratégias destinadas a controlar esses patógenos estão sendo investigadas. Nesse contexto e assumindo que a sertralina (SRT) tem sido explorada por suas propriedades antifúngicas, objetivamos avaliar alterações na expressão de genes relacionados ao mecanismo de adaptação e resistência em T. rubrum. Para isso, realizamos um sequenciamento de alto rendimento do RNA de T. rubrum cultivado na presença de dose subletal de SRT. Também investigamos neste estudo a atividade antifúngica do antidepressivo SRT, isoladamente ou em combinação com a caspofungina (CASP). Calculamos as concentrações inibitórias mínimas de SRT e CASP contra T. rubrum. Além disso, as interações entre SRT e CASP foram avaliadas usando um método de microdiluição em \"xadrez\'. Usamos ensaios de MTT e cristal violeta para comparar o efeito de SRT e da combinação de SRT com CASP no biofilme de T. rubrum. Também realizamos um ensaio de infecção de unha humana. O RNA-seq revelou 541 genes modulados em 3 h e 1.569 genes modulados em 12 h de cultivo na presença de SRT. Identificamos alguns genes possivelmente relacionados ao efluxo da SRT e sugerimos alvos terapêuticos promissores em alguns componentes da parede celular. SRT sozinha, ou em combinação com CASP, exibiu atividade antifúngica contra T. rubrum. A combinação SRT/CASP reprime genes essenciais relacionados à virulência e resistência. A SRT tem como alvos prioritários genes envolvidos na biossíntese da parede celular e do ergosterol. Além disso, a atividade metabólica do biofilme de T. rubrum e sua biomassa foram afetadas pela SRT e pela combinação de SRT e CASP. SRT sozinha, ou em combinação, mostra potencial como uma abordagem para minimizar a resistência e reduzir a virulência fúngica.