Perfil proteolítico de células de leucemia mielóide crônica

Objetivo: Identificação e diferenciação das classes das proteases presentes em células de Leucemia Mielóide Crônica (K562 e Lucena 1) por estudo da interferência de pH e variação de substratos enzimáticos sobre suas atividades proteolíticas; comparação de proteases intracelulares das duas linhagens...

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Detalhes bibliográficos
Autor: Amador, Fernanda Cardoso [UNIFESP]
Tipo de documento: dissertação
Estado:Versão publicada
Data de publicação:2020
País:Brasil
Recursos:Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Repositório:Repositório Institucional da UNIFESP
Idioma:português
OAI Identifier:oai:repositorio.unifesp.br:11600/64293
Acesso em linha:https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=9279240
https://hdl.handle.net/11600/64293
Access Level:Acceso aberto
Palavra-chave:Chronic myeloid leukemia
MDR
Protease
Leukemia, myelogenous, chronic, BCR-ABL positive
K562 cells
Peptide hydrolases
Leucemia mielóide crônica
Leucemia mielogênica crônica BCR-ABL positiva
Peptídeo hidrolases
Células K562
Descrição
Resumo:Objetivo: Identificação e diferenciação das classes das proteases presentes em células de Leucemia Mielóide Crônica (K562 e Lucena 1) por estudo da interferência de pH e variação de substratos enzimáticos sobre suas atividades proteolíticas; comparação de proteases intracelulares das duas linhagens celulares, por análise peptidômica; tratamento de dados in silico para mapeamento de proteases. Métodos: Foram realizadas lises das duas linhagens celulares estudadas e análises por variação de substratos e pHs em estudos de fluorescência por hidrólise de substratos, análise peptidômica por cromatografia e espectrometria de massas e tratamento in silico de dados para mapeamento de proteases. Resultados: Foi possível identificar através dos ensaios realizados as classes de proteases presentes nas duas linhagens e diferenciá-las. A maioria das proteases encontradas em ambas as linhagens são semelhantes, corroborando com o fato de as células Lucena 1 serem semelhantes às células K562 – ambas linhagens de Leucemia Mielóide Crônica - contendo apenas a diferença do desenvolvimento da Resistência à Múltiplas Drogas na Lucena 1. Contudo, a presença da protease Suppressor of tumorigenicity 14 protein (EC:3.4.21.109) apenas nas células de Lucena 1 concluem a diferença buscada nesta pesquisa. Conclusões: A protease em questão foi descrita como coadjuvante no desenvolvimento da Resistência à Múltiplas Drogas em células de Leucemia Mielóide Crônica tratadas com quimioterápico doxorrubicina. A identificação desta enzima proteolítica é fundamental para o desenvolvimento de métodos de tratamentos futuros, tendo em vista que os medicamentos para cura da Leucemia são funcionais em sua grande maioria tendo como infortúnio a perspicácia das células tumorais em desenvolverem resistência aos quimioterápicos.