Comparação da detecção de autoanticorpos MOG-IgG pelo ensaio baseado em células avaliado pela imunofluorescência indireta por microscopia vs citometria de fluxo

A glicoproteína da mielina dos oligodendrócitos (MOG) é uma proteína encontrada exclusivamente no sistema nervoso central (SNC), expressa na superfície externa da mielina e dos oligodendrócitos. A MOG é um alvo acessível para autoanticorpos em que a imunoglobulina G reativa para MOG (MOG-IgG) está a...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: Marchionatti, Amanda
Tipo de recurso: tesis de maestría
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2020
País:Brasil
Institución:Pontifícia Universidade Católica do Rio Grande do Sul (PUCRS)
Repositorio:Biblioteca Digital de Teses e Dissertações da PUC_RS
Idioma:portugués
OAI Identifier:oai:tede2.pucrs.br:tede/9319
Acceso en línea:http://tede2.pucrs.br/tede2/handle/tede/9319
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:Doenças Desmielinizantes
Ensaio Baseado em Células
Glicoproteína da Mielina dos Oligodendrócitos
Demyelinating Diseases
Cell-based assay
Myelin Oligodendrocyte Glycoprotein
CIENCIAS DA SAUDE::MEDICINA
Descripción
Sumario:A glicoproteína da mielina dos oligodendrócitos (MOG) é uma proteína encontrada exclusivamente no sistema nervoso central (SNC), expressa na superfície externa da mielina e dos oligodendrócitos. A MOG é um alvo acessível para autoanticorpos em que a imunoglobulina G reativa para MOG (MOG-IgG) está associada à desmielinização mediada por imunidade no SNC. O MOG-IgG é detectado pelo ensaio baseado em células (CBA), técnica que melhorou a identificação de ligação de MOG-IgG de maneira clinicamente significativa. Entretanto, existem diversos fatores que pode influenciar no CBA, como a quantidade de soro utilizada e a forma de leitura, que pode ser realizada por imunofluorescência indireta analisada pelo microscópio (CBA-IFI) ou por citometria de fluxo (CBA-CF). O CBA-IFI já é bastante utilizado na prática clínica, entretanto, o CBA-CF ainda necessita de mais estudos para ser padronizado. Ainda não existe consenso sobre qual a quantidade de soro ideal a ser utilizada ou qual a melhor forma de analisar os resultados, que podem ser calculados pela razão ou pela delta do sinal médio da intensidade de fluorescência entre as células transfectadas com MOG versus células não transfectadas. Assim, o objetivo deste trabalho foi verificar se existe comparação na detecção de anticorpos por imunofluorescência indireta por microscopia versus citometria de fluxo, além de avaliar qual a melhor diluição e forma de analisar os resultados obtidos pelo CF. Para tal, CBA-IFI e CBA-CF foram realizados em 104 pacientes com suspeita de positividade para MOG-IgG, sendo o CBA-CF realizado nas diluições 1:20 e 1:100 e seu valor de positividade avaliado pela razão e pelo delta. Os dados obtidos mostraram que os anticorpos detectados pelo CBA-CF e CBA-IFI possuem 90,4% de concordância e os títulos do CBA-IFI se correlacionam com os resultados do CBACF, principalmente analisados por razão, em diluições mais elevadas. Assim, concluímos tanto o CBA-IFI quanto o CBA-CF podem ser aplicados na rotina, pois esses ensaios podem compensar os pontos fracos um do outro, revelando um resultado mais exato quando MOG-IgG é detectado por ambos.