Expresión recombinante del antígeno tE2 del virus de la diarrea viral bovina (BVDV) en plantas de Nicotiana tabacum y estudio de su bioseguridad en ratones
En el presente trabajo se expresaron el antígeno vacunal tE2 del virus de la diarrea viral bovina (BVDV) y la proteína marcadora de fluorescencia EGFP en forma transitoria en hojas de Nicotiana tabacum, utilizando como vector Agrobacterium tumefaciens. Analizando la supervivencia microbiana y la per...
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| Format: | article |
| Status: | Published version |
| Publication Date: | 2016 |
| Country: | Argentina |
| Institution: | Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas |
| Repository: | CONICET Digital (CONICET) |
| Language: | English |
| OAI Identifier: | oai:ri.conicet.gov.ar:11336/40177 |
| Online Access: | http://hdl.handle.net/11336/40177 |
| Access Level: | Open access |
| Keyword: | AGROINFILTRACION PROTEINAS RECOMBINANTES https://purl.org/becyt/ford/1.6 https://purl.org/becyt/ford/1 |
| Summary: | En el presente trabajo se expresaron el antígeno vacunal tE2 del virus de la diarrea viral bovina (BVDV) y la proteína marcadora de fluorescencia EGFP en forma transitoria en hojas de Nicotiana tabacum, utilizando como vector Agrobacterium tumefaciens. Analizando la supervivencia microbiana y la persistencia del RNA/proteína de EGFP pudimos estimar un riesgo ambiental hasta 6 días después de la agroinfiltración. La cinética de tiempo y el análisis de imágenes para EGFP muestran el silenciamiento de la expresión de la proteína heteróloga 6 días después de la infiltración con la cepa de Agrobacterium recombinante en las hojas de tabaco tratadas. Los extractos foliares expresando tE2 fueron clarificados y mezclados con un adyuvante oleoso o acuosos. Estos candidatos a vacunas se administraron a ratones hembra Balb/c (inoculación primaria intramuscular seguida por tres dosis de refuerzo). No se observaron diferencias significativas entre los extractos no recombinantes (tratamiento control) o extractos foliares recombinantes en el análisis clínico y bioquímico. En todos los ratones inyectados, el adyuvante provocó las lesiones patológicas clásicas observadas en los procesos inflamatorios en el sitio de inoculación. Secciones histológicas de estas lesiones y de los órganos principales no mostraron lesiones adicionales. |
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