Obtención de plantas de tomate (Solanum lycopersicum) sobreexpresantes del gen SCE1, como candidato a conferir resistencia contra Clavibacter michiganensis subsp. Michiganensis
"El tomate (Solanum lycopersicum), es la hortaliza que se cultiva a mayor escala en el mundo. Sin embargo, enfermedades como el cáncer bacteriano causado por la bacteria Gram positiva Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis (Cmm), constituyen uno de los factores limitantes más importante...
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| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2014 |
| País: | México |
| Institución: | Instituto Potosino de Investigación Científica y Tecnológica |
| Repositorio: | Repositorio Institucional del IPICYT |
| OAI Identifier: | oai:ipicyt.repositorioinstitucional.mx:1010/1823 |
| Acceso en línea: | http://ipicyt.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1010/1823 |
| Access Level: | acceso embargado |
| Palabra clave: | info:eu-repo/classification/Autor/Tomate info:eu-repo/classification/Autor/Clavibacter michiganensis subsp. Michiganensis info:eu-repo/classification/Autor/SUMO info:eu-repo/classification/cti/2 info:eu-repo/classification/cti/24 info:eu-repo/classification/cti/2415 |
| Sumario: | "El tomate (Solanum lycopersicum), es la hortaliza que se cultiva a mayor escala en el mundo. Sin embargo, enfermedades como el cáncer bacteriano causado por la bacteria Gram positiva Clavibacter michiganensis subsp. michiganensis (Cmm), constituyen uno de los factores limitantes más importantes en su producción. El control convencional que se utiliza para enfermedades bacterianas de tomate implica el uso de agroquímicos, como compuestos derivados de cobre, sales cuaternarias de amonio, o antibióticos, que no han sido muy efectivos contra Cmm, lo que ha provocado pérdidas económicas importantes en el país y el mundo entero. En este sentido, la obtención de cultivares de tomate resistentes a este patógeno sería una estrategia de control favorable para el ambiente al reducir el uso de agroquímicos. Este trabajo se enfoca en lograr la sobreexpresión del gen SCE1 en tomate, el cual, de acuerdo a resultados obtenidos previamente por nuestro grupo de trabajo, parece estar involucrado en la resistencia a Cmm, ya que su silenciamiento por RNA interferente aumentó la susceptibilidad de las plantas a infecciones por esa bacteria. Para cubrir ese objetivo, se estandarizó un protocolo de transformación en un tomate comercial S. lycopersicum var. Ailsa Craig, usando hipocotilos como explante inicial y se evaluó la eficiencia de transformación probando cuatro cepas de Agrobacterium tumefaciens: c58, GV3101, LBA4404 y GV3010, que albergan un vector binario para la expresión del gen SCE1 bajo la regulación del promotor 35S CaMV, así como una regeneración eficiente de las plantas transformadas. La transformación de las plantas fue confirmada mediante la técnica de PCR para el transgén SCE1 y el marcador de selección nptII. La cepa de A. tumefaciens que presentó un mejor balance entre la eficiencia de transformación (18%) y supervivencia (54%) fue la GV3101. Adicionalmente, se analizaron cuatro de las líneas T0 obtenidas mediante un análisis de RT-PCR semicuantitativo que reveló la sobreexpresión constitutiva del gen SCE1. También se realizó un análisis por Southern blot que mostró la inserción del TDNA en al menos una de las líneas T0 sobreexpresantes, por lo que concluimos que éste es un método eficiente, y rápido para introducir genes de interés en tomate; el próximo paso es someter a reto con Cmm a las plantas sobreexpresantes del gen SCE1." |
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