Efecto de extractos de cultivo sumergido de pleurotus ostreatus, pleurotus djamor y pleurotus agaves sobre la activación in vitro de macrófagos

RESUMEN Las especies del género Pleurotus son conocidas como hongos comestibles, de las cuales también se han reportado propiedades farmacológicas como anti-lipidémica y antiinflamatoria, debido a la presencia de estatinas y otros metabolitos bioactivos. Sin embargo, no todas las especies tienen est...

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Detalles Bibliográficos
Autor: SANDRA GOMEZ VELAZQUEZ
Tipo de recurso: tesis de maestría
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2018
País:México
Institución:Universidad Autónoma del Estado de Morelos
Repositorio:Repositorio Institucional de Acceso Abierto de la Universidad Autónoma del Estado de Morelos
Idioma:español
OAI Identifier:oai:http://riaa.uaem.mx:20.500.12055/424
Acceso en línea:http://riaa.uaem.mx/handle/20.500.12055/424
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:info:eu-repo/classification/cti/3
info:eu-repo/classification/cti/32
Descripción
Sumario:RESUMEN Las especies del género Pleurotus son conocidas como hongos comestibles, de las cuales también se han reportado propiedades farmacológicas como anti-lipidémica y antiinflamatoria, debido a la presencia de estatinas y otros metabolitos bioactivos. Sin embargo, no todas las especies tienen estas propiedades y el potencial farmacológico de cepas mexicanas no ha sido reportado. Es por ello que, en este estudio realizamos el crecimiento biotecnológico de Pleurotus ostreatus cepa CP-50, P. djamor cepa P-50 y P. agaves cepa P-52, utilizando un sustrato no convencional, con el objetivo de evaluar la actividad antiinflamatoria de los metabolitos intracelulares y extracelulares, en un modelo in vitro. Los hongos fueron crecidos en medio de cultivo líquido usando un sustrato no convencional (BFL+C). Los pellets del cultivo fúngico fueron separados por filtración, la biomasa fue liofilizada y el medio líquido fue utilizado directamente para la extracción. En estas condiciones de crecimiento, la producción de biomasa seca fue 5.40, 4.94 y 4.27 g/L y la velocidad de crecimiento de 0.11, 0.13 y 0.10 horas-1, para P. ostreatus, P. djamor y P. agaves, respectivamente. La biomasa seca y el medio líquido fueron extraídos utilizando acetato de etilo como disolvente. Los ensayos de citotoxicidad fueron realizados para determinar las concentraciones seguras de los extractos, y se evaluó el efecto en la producción de NO, TNF e IL-6 en macrófagos estimulados con LPS a diferentes concentraciones, mediante la reacción de Griess o ELISA. La activación de NF-kB fue evaluada en los macrófagos de la línea celular RAW-Blue™. Los resultados fueron comparados con las células tratadas con indometacina. Finalmente, se realizó un perfil cromatográfico y análisis de RMN para comparar los metabolitos entre las diferentes cepas. Nosotros observamos que el extracto del medio líquido (ELM) de las tres especies fue citotóxico por arriba de los 50 μg/mL, mientras que el extracto del micelio (EM) fue citotóxico por arriba de 25 μg/mL para P. ostreatus, y arriba de 50 μg/mL para P. djamor y P. agaves. Por lo tanto, para los ensayos de actividad antiinflamatoria utilizamos concentraciones menores a esas, donde el EM de las tres cepas tuvo mayor efecto inhibitorio que ELM, en la producción de mediadores pro-inflamatorios. En este caso, las células tratadas con ELM de P. ostreatus y P. agaves redujeron la producción de NO, IL-6 y TNF a 50 μg/mL, pero los extractos de P. djamor no tuvieron efecto. Por Página | IX otro lado, EM de las tres especies redujo la producción de ON incluso a 3 μg/mL, y para TNF a 12.5 y 25 ug/mL. Para IL-6 sólo P. agaves redujo su secreción. Claramente, la activación de NF-kB fue drásticamente inhibida con todas las cepas evaluadas. El perfil cromatográfico de los extractos de acetato de etilo de P. ostreatus y P. djamor mostraron mayor similitud que P. djamor y, el análisis preliminar de RMN sugirió ácidos grasos como metabolitos mayoritarios. En conclusión, este trabajo confirmó el potencial uso de P. ostreatus como fuente de metabolitos antiinflamatorios, y por primera vez para P. agaves. Interesantemente, P. djamor presentó un diferente perfil metabólico y tuvo menos potencial antiinflamatorio.

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