Proceso para la purificación del colorante proteico b-ficoeritrina producido por Porphyridium cruentum
Se presenta el desarrollo de un proceso simplificado para la purificación de B-ficoeritrina (BFE) producida porPorphyridium cruentum explotando el uso de sistemas de dos fases acuosas (SDFA) y precipitación isoeléctrica. Laevaluación del efecto de dos métodos de ruptura celular sobre la liberación d...
| Autores: | , , |
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| Tipo de recurso: | artículo |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2006 |
| País: | México |
| Institución: | Instituto Tecnológico y de Estudios Superiores de Monterrey |
| Repositorio: | Redalyc-ITESM |
| OAI Identifier: | oai:redalyc.org:62050204 |
| Acceso en línea: | https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=62050204 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Ingeniería ficoeritrina Porphyridium cruentum recuperación de proteínas sistemas de dos fases acuosas |
| Sumario: | Se presenta el desarrollo de un proceso simplificado para la purificación de B-ficoeritrina (BFE) producida porPorphyridium cruentum explotando el uso de sistemas de dos fases acuosas (SDFA) y precipitación isoeléctrica. Laevaluación del efecto de dos métodos de ruptura celular sobre la liberación de las proteínas intracelulares de P.cruentum, demostró que sonicación fue superior a maceración manual debido a que se obtuvo un incremento decinco veces en la concentración de BFE liberada. Se realizó la evaluación del comportamiento de BFE en SDFA conpoli-etilen-glicol (PEG)-sulfato, PEG-fosfato y PEG-dextrano para determinar bajo que condiciones BFE y loscontaminantes se podrían concentrar en fases opuestas. El SDFA con PEG de peso molecular 1000 g/mol y fosfatopermitió, después de precipitación isoeléctrica a pH 4.0, la recuperación de BFE purificada (definida como unarelación de absorbancias a 545 y 280nm mayor a 4.0) con un valor comercial de $50 dólares/mg. La etapa deextracción de SDFA seleccionada (29.5% p/p de PEG1000, de 9.0% p/p de fosfato, relación de volumen de las fases(Vr) igual a uno y pH de 7.0,) conteniendo una concentración de extracto crudo (generado por precipitación)equivalente al 40% p/p del sistema de extracción, permitió recuperar BFE con un rendimiento del 72% y una purezade 4.1+0.2. La pureza de BFE del extracto original se incrementó 5.9 veces después de la precipitación isoeléctrica ySDFA. Los resultados de este estudio demuestran los beneficios de la aplicación práctica de la precipitaciónisoeléctrica en conjunto con los SDFA para el desarrollo de un proceso que permita la purificación de BFE producidapor Porphyridium cruentum. |
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