Obtención de anticuerpos tipo vNAR que reconocen y neutralizan venenos de alacrán
El alacranismo es un grave problema de salud pública en algunos países. Se presenta en muchas regiones en el mundo como en el Norte y Sur de África, India, Medio Oriente, Turquía, Francia, España, Mongolia, China, Asia Central y en América, en donde México tiene el mayor índice de alacranismo a nive...
| Author: | |
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| Format: | master thesis |
| Status: | Published version |
| Publication Date: | 2009 |
| Country: | México |
| Institution: | Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada |
| Repository: | Repositorio Institucional CICESE |
| Language: | Spanish |
| OAI Identifier: | oai:cicese.repositorioinstitucional.mx:1007/2735 |
| Online Access: | http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/2735 |
| Access Level: | Open access |
| Keyword: | info:eu-repo/classification/Autor/Alacranismo, Androctonus australis, Leiurus quinquestriatus, Veneno de alacrán,vNAR, Heterodontus franscisci, Scorpionism info:eu-repo/classification/cti/2 info:eu-repo/classification/cti/24 info:eu-repo/classification/cti/2414 |
| Summary: | El alacranismo es un grave problema de salud pública en algunos países. Se presenta en muchas regiones en el mundo como en el Norte y Sur de África, India, Medio Oriente, Turquía, Francia, España, Mongolia, China, Asia Central y en América, en donde México tiene el mayor índice de alacranismo a nivel mundial. El método tradicional de producción de antivenenos a partir de suero de animales inmunizados ha resultado ser un proceso muy costoso y lento en comparación con las nuevas tecnologías de producción de anticuerpos recombinantes, en las cuales se puede llevar a cabo la selección de anticuerpos que reconocen el antígeno de interés, a partir de bibliotecas peptídicas obtenidas por despliegues en fagos. Por medio de HPLC (High Performance Liquid Chromatography), se aislaron fracciones de los venenos de los alacranes Androctonus australis y Leiurus quinquestriatus, para ser utilizadas en ensayos in vivo en ratones, con la finalidad de detectar la fracción letal y utilizar esta fracción con antígeno. Para seleccionar fragmentos de anticuerpo tipo vNAR específicos contra las fracciones letales de los venenos de Androctonus australis y Leiurus quinquestriatus, se utilizó una biblioteca formícida no inmune de un tiburón Heterodontus francisci. Se aislaron fragmentos de anticuerpo tipo vNAR desplegados en bacteriófagos, y se seleccionaron los que presentaron mayor reconocimiento por el antígeno en ensayos de ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), para posteriormente probar su efecto neutralizante in vivo en ratones. Los ensayos de neutralización mostraron un retraso considerable en el tiempo de muerte de los organismos, así como sobrevivencia en algunos casos, lo que nos permite concluir que losvNAR aislados tienen actividad neutralizante. |
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