Detección de citomegalovirus en plasma de pacientes con VIH mediante PCR dúplex en tiempo real

Introducción: El citomegalovirus (CMV) es capaz de provocar enfermedades graves e incluso mortales en pacientes inmunocomprometidos. Es importante contar con pruebas moleculares de detección viral, sensibles y específicas, utilizando como blanco los genes clave para la replicación viral. En la detec...

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Detalles Bibliográficos
Autores: Hilda Alicia Valdez-Salazar, Nancy Sánchez-Nájera, Rosa María Ribas-Aparicio, Ericka Nelly Pompa-Mera, José Antonio Mata-Marín, Alejandro Gómez-Delgado, Penélope Aguilera, Martha Eugenia Ruiz-Tachiquín
Tipo de recurso: artículo
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2020
País:México
Institución:Secretaría de Salud
Repositorio:Redalyc-SSA
OAI Identifier:oai:redalyc.org:457767703013
Acceso en línea:https://www.redalyc.org/articulo.oa?id=457767703013
https://www.redalyc.org/journal/4577/457767703013/
https://www.redalyc.org/journal/4577/457767703013/html/
https://www.redalyc.org/journal/4577/457767703013/457767703013.epub
https://www.redalyc.org/journal/4577/457767703013/movil
https://doi.org/10.24875/RMIMSS.M20000013
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:Medicina
UL83
UL122
Plasma
Citomegalovirus
Reacción en Cadena de la Polimerasa
Descripción
Sumario:Introducción: El citomegalovirus (CMV) es capaz de provocar enfermedades graves e incluso mortales en pacientes inmunocomprometidos. Es importante contar con pruebas moleculares de detección viral, sensibles y específicas, utilizando como blanco los genes clave para la replicación viral. En la detección molecular de CMV se han utilizado los genes UL122 (replicación) y UL83 (proteína más abundante del tegumento). Objetivo: Detectar y cuantificar el CMV mediante reacción en cadena de la polimerasa (PCR) dúplex en tiempo real, a partir de una mínima cantidad de plasma. Material y métodos: Los genes UL122 y UL83 se amplificaron con diferentes fluoróforos mediante PCR dúplex en tiempo real. Para cuantificar el CMV se generó una recta estándar, a partir de DNA del CMV (1.0-0.0000001 ng). Resultados: El rango dinámico de la «recta maestra» tuvo una pendiente (m) de −3.0; la eficiencia de amplificación fue del 115.44%; de los plasmas de pacientes con infección por el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) con una carga viral ≥ 100,000 copias/ml, el 11.36% fueron verdaderos positivos para CMV y el 88.64% no tuvieron amplificaciones o estuvieron fuera del rango lineal de detección molecular. Conclusiones: Esta prueba identificó dos genes importantes del CMV (UL122 y UL83) en una sola reacción (FAM:VIC), y se ratificó la detección viral a partir de una mínima cantidad de plasma. Esto se traduce en una menor cantidad de muestra biológica requerida y sumaría una herramienta al área clínica, así como un menor consumo de reactivos y materiales.