Estudio de los peroxisomas y las peroxinas en el desarrollo vegetativo y sexual de Neurospora crassa
Previamente, en nuestro grupo de trabajo se han caracterizado los orgánulos involucrados en la vía secretora que contribuyen al crecimiento apical de Neurospora crassa. Éstos incluyen el retículo endoplásmico (RE), las cisternas de Golgi, las vacuolas y las vesículas secretoras. Este estudio se enfo...
| Autor: | |
|---|---|
| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2020 |
| País: | México |
| Institución: | Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada |
| Repositorio: | Repositorio Institucional CICESE |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:cicese.repositorioinstitucional.mx:1007/3301 |
| Acceso en línea: | http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/3301 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | info:eu-repo/classification/Autor/peroxinas, peroxisomas, desarrollo vegetativo, desarrollo sexual, transporte endosomal y Neurospora crassa info:eu-repo/classification/Autor/peroxins, peroxisomes, vegetative development, sexual development, endosomal transport and Neurospora crassa info:eu-repo/classification/cti/2 info:eu-repo/classification/cti/24 info:eu-repo/classification/cti/2414 info:eu-repo/classification/cti/241406 |
| Sumario: | Previamente, en nuestro grupo de trabajo se han caracterizado los orgánulos involucrados en la vía secretora que contribuyen al crecimiento apical de Neurospora crassa. Éstos incluyen el retículo endoplásmico (RE), las cisternas de Golgi, las vacuolas y las vesículas secretoras. Este estudio se enfocó en las interacciones del RE con otros orgánulos, principalmente los peroxisomas, ya que hay evidencia de que el RE participa en la biogénesis de los peroxisomas. En los hongos filamentosos los peroxisomas tienen muchas funciones; por ejemplo, participan en el metabolismo primario y secundario, en el desarrollo vegetativo y sexual, así como en la protección contra el daño mecánico. En este proyecto se estudió el papel de tres peroxinas (PEX), proteínas de biogénesis peroxisomal, en el desarrollo sexual y en el crecimiento vegetativo de N. crassa. Se analizaron cepas mutantes que carecen de PEX-1, PEX-10 y PEX-14. Estas peroxinas son responsables de la importación de proteínas en los peroxisomas y, por lo tanto, en la maduración y el correcto funcionamiento de estos orgánulos. Para caracterizar las cepas ∆pex, se midió la tasa de crecimiento radial, macroconidiación, ramificación, diámetro de hifas y producción de hifas aéreas. Con los resultados obtenidos, se determinó que la eliminación de los genes pex-1, pex-10 y pex-14 afecta la macroconidiación y en menor medida otros aspectos del desarrollo vegetativo. También se analizó el desarrollo sexual por medio de cruzas sexuales y se determinó que PEX-14 es esencial para el desarrollo sexual, ya que su eliminación genera esterilidad femenina. Por otra parte, se ha determinado la localización subcelular de los peroxisomas mediante la fusión de una secuencia de orientación peroxisomal (PTS1) a la proteína fluorescente TagRFP. En el análisis por microscopía confocal de hifas co-expresando peroxisomas y otros orgánulos marcados con proteínas fluorescentes o teñidos con fluorocromos, se observó transporte a través de microtúbulos y co-transporte con endosomas tempranos y gotas lipídicas. Estos resultados permitieron la construcción de un modelo de transporte “pero-endo” en N. crassa en donde los peroxisomas se co-transportan junto con los endosomas tempranos y las gotas lipídicas de forma rápida y dirigida a través de los microtúbulos. Por último, ninguna de las cepas Δpex (-1, -10, -14) crecieron en medio con ácido oleico, sugiriendo que sus peroxisomas no son funcionales. Para comprobarlo, se analizó la ... |
|---|