Obtención de Variantes Hiperactivas e Inactivas de la Endocelulasa Cel9 de Myxobacter Sp. Al-1

Due to its biotechnological impact, there is currently a growing interest in the production of cellulases with novel biochemical properties. Here, multiple generations of random mutagenesis in vivo and screening were employed to generate variants of the modular cellulase Cel9 from Myxobacter Sp. AL-...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autores: Castellanos Juárez, Francisco X., Sandoval, Ada A., Urtiz-Estrada, Norma, Pedraza-Reyes, Mario
Tipo de recurso: artículo
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2006
País:México
Institución:UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO
Repositorio:Acta Universitaria
Idioma:español
OAI Identifier:oai:www.actauniversitaria.ugto.mx:article/196
Acceso en línea:https://www.actauniversitaria.ugto.mx/index.php/acta/article/view/196
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:Celulosa
Celulasas
Evolución de proteínas.
Cellulose
Cellulases
Protein evolution.
id MX_72aa84c3cf423c3045a4e72738ffa9bd
oai_identifier_str oai:www.actauniversitaria.ugto.mx:article/196
network_acronym_str MX
network_name_str México
repository_id_str
spelling Obtención de Variantes Hiperactivas e Inactivas de la Endocelulasa Cel9 de Myxobacter Sp. Al-1Obtención de Variantes Hiperactivas e Inactivas de la Endocelulasa Cel9 de Myxobacter Sp. Al-1Castellanos Juárez, Francisco X.Sandoval, Ada A.Urtiz-Estrada, NormaPedraza-Reyes, MarioCelulosaCelulasasEvolución de proteínas.CelluloseCellulasesProtein evolution.Due to its biotechnological impact, there is currently a growing interest in the production of cellulases with novel biochemical properties. Here, multiple generations of random mutagenesis in vivo and screening were employed to generate variants of the modular cellulase Cel9 from Myxobacter Sp. AL-1. Following this approach, Cel9 variants which showed increases upto 7.5 fold of cellulase activity were obtained. In addition, Cel9 mutants which completely lost the ability to degrade cellulose were also obtained. Results revealed that mutations associated with the phenotype of the Cel9 variants occurred on the mutant gene sequence and that themutants with null or reduced activity did not accumulate in the cell. In addition to the potential biotechnological application of the enzymes with improved activity obtained here, the results of this work will contribute to the understanding of the structure and function of cellulases grouped in the family 9 of glycosyl hydrolases.Debido a su aplicación industrial, existe un gran interés en la producción de celulasas con propiedades bioquímicas novedosas. Por ello, en el presente trabajo se utilizó una estrategia basada en un método de mutagénesis aleatoria in vivo para la obtención de variantes de la endocelulasa Cel9 del microorganismo gram-negativo Myxobacter Sp. AL-1. Siguiendo este enfoque, se obtuvieron cepas transformantes de Escherichia coli capaces de secretar variantes de la proteína Cel9 cuyas actividades específicas fueron incrementadas hasta 7.5 veces con respecto a la actividad mostrada por la enzima nativa. Del mismo modo, se generaron cepas de E. coli productoras de variantes de la proteína Cel9 con baja o nula actividad enzimática. Experimentos de subclonación y fraccionamiento celular revelaron que las mutaciones asociadas con los fenotipos de las variantes de la enzima Cel9 ocurrieron en la secuencia del gen cel9. Así mismo, se demostró que los fenotipos de las cepas mutantes carentes de actividad enzimática no dependen de su incapacidad para secretar las proteínas mutantes. Además de su potencial aplicación biotecnológica, los resultados obtenidos en este trabajo permiten avanzar en el entendimiento de la relación estructura-función de la celulasa Cel9 de Myxobacter Sp. AL-1.Universidad de Guanajuato2006-04-01info:eu-repo/semantics/articleinfo:eu-repo/semantics/publishedVersionResearchArtículo revisado por paresInvestigaciónapplication/pdfhttps://www.actauniversitaria.ugto.mx/index.php/acta/article/view/19610.15174/au.2006.196Acta Universitaria; Vol. 16 Núm. 1 (2006); 22-28Acta Universitaria; Vol. 16 No. 1 (2006); 22-282007-96210188-6266reponame:Acta Universitariainstname:UNIVERSIDAD DE GUANAJUATOinstacron:UGTOspahttps://www.actauniversitaria.ugto.mx/index.php/acta/article/view/196/176info:eu-repo/semantics/openAccessoai:www.actauniversitaria.ugto.mx:article/1962024-08-16T21:06:28Z
dc.title.none.fl_str_mv Obtención de Variantes Hiperactivas e Inactivas de la Endocelulasa Cel9 de Myxobacter Sp. Al-1
Obtención de Variantes Hiperactivas e Inactivas de la Endocelulasa Cel9 de Myxobacter Sp. Al-1
title Obtención de Variantes Hiperactivas e Inactivas de la Endocelulasa Cel9 de Myxobacter Sp. Al-1
spellingShingle Obtención de Variantes Hiperactivas e Inactivas de la Endocelulasa Cel9 de Myxobacter Sp. Al-1
Castellanos Juárez, Francisco X.
Celulosa
Celulasas
Evolución de proteínas.
Cellulose
Cellulases
Protein evolution.
title_short Obtención de Variantes Hiperactivas e Inactivas de la Endocelulasa Cel9 de Myxobacter Sp. Al-1
title_full Obtención de Variantes Hiperactivas e Inactivas de la Endocelulasa Cel9 de Myxobacter Sp. Al-1
title_fullStr Obtención de Variantes Hiperactivas e Inactivas de la Endocelulasa Cel9 de Myxobacter Sp. Al-1
title_full_unstemmed Obtención de Variantes Hiperactivas e Inactivas de la Endocelulasa Cel9 de Myxobacter Sp. Al-1
title_sort Obtención de Variantes Hiperactivas e Inactivas de la Endocelulasa Cel9 de Myxobacter Sp. Al-1
dc.creator.none.fl_str_mv Castellanos Juárez, Francisco X.
Sandoval, Ada A.
Urtiz-Estrada, Norma
Pedraza-Reyes, Mario
author Castellanos Juárez, Francisco X.
author_facet Castellanos Juárez, Francisco X.
Sandoval, Ada A.
Urtiz-Estrada, Norma
Pedraza-Reyes, Mario
author_role author
author2 Sandoval, Ada A.
Urtiz-Estrada, Norma
Pedraza-Reyes, Mario
author2_role author
author
author
dc.subject.none.fl_str_mv Celulosa
Celulasas
Evolución de proteínas.
Cellulose
Cellulases
Protein evolution.
topic Celulosa
Celulasas
Evolución de proteínas.
Cellulose
Cellulases
Protein evolution.
description Due to its biotechnological impact, there is currently a growing interest in the production of cellulases with novel biochemical properties. Here, multiple generations of random mutagenesis in vivo and screening were employed to generate variants of the modular cellulase Cel9 from Myxobacter Sp. AL-1. Following this approach, Cel9 variants which showed increases upto 7.5 fold of cellulase activity were obtained. In addition, Cel9 mutants which completely lost the ability to degrade cellulose were also obtained. Results revealed that mutations associated with the phenotype of the Cel9 variants occurred on the mutant gene sequence and that themutants with null or reduced activity did not accumulate in the cell. In addition to the potential biotechnological application of the enzymes with improved activity obtained here, the results of this work will contribute to the understanding of the structure and function of cellulases grouped in the family 9 of glycosyl hydrolases.
publishDate 2006
dc.date.none.fl_str_mv 2006-04-01
dc.type.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/article
info:eu-repo/semantics/publishedVersion
Research
Artículo revisado por pares
Investigación
format article
status_str publishedVersion
dc.identifier.none.fl_str_mv https://www.actauniversitaria.ugto.mx/index.php/acta/article/view/196
10.15174/au.2006.196
url https://www.actauniversitaria.ugto.mx/index.php/acta/article/view/196
identifier_str_mv 10.15174/au.2006.196
dc.language.none.fl_str_mv spa
language spa
dc.relation.none.fl_str_mv https://www.actauniversitaria.ugto.mx/index.php/acta/article/view/196/176
dc.rights.none.fl_str_mv info:eu-repo/semantics/openAccess
eu_rights_str_mv openAccess
dc.format.none.fl_str_mv application/pdf
dc.publisher.none.fl_str_mv Universidad de Guanajuato
publisher.none.fl_str_mv Universidad de Guanajuato
dc.source.none.fl_str_mv Acta Universitaria; Vol. 16 Núm. 1 (2006); 22-28
Acta Universitaria; Vol. 16 No. 1 (2006); 22-28
2007-9621
0188-6266
reponame:Acta Universitaria
instname:UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO
instacron:UGTO
instname_str UNIVERSIDAD DE GUANAJUATO
instacron_str UGTO
institution UGTO
reponame_str Acta Universitaria
collection Acta Universitaria
repository.name.fl_str_mv
repository.mail.fl_str_mv
_version_ 1858175707112275968
score 15,811543