Efecto de las sobreexpresión del gen lovE sobre la fisiología de Aspergillus terreus, en fermentación sólida y líquida
El hipercolesterolemico lovastatina se produce en forma convencional por fermentación líquida por Aspergillus terreus, aunque últimamente se ha utilizado la fermentación sólida (FS), un nuevo sistema que involucra un material inerte como soporte y muestra una productividad sorprendente. Una desventa...
| Autor: | |
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| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2012 |
| País: | México |
| Institución: | Universidad Autónoma Metropolitana |
| Repositorio: | Repositorio Institucional de la UAM Iztapalapa |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:bindani.izt.uam.mx:sj1392125 |
| Acceso en línea: | https://doi.org/10.24275/uami.sj1392125 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | info:eu-repo/classification/LEM/Fermentación en medio líquido info:eu-repo/classification/LEM/Fermentation -- Biotechnology info:eu-repo/classification/LEM/Aspergillus terreus -- Biotechnology info:eu-repo/classification/LEM/Aspergillus terreus -- Biotecnología info:eu-repo/classification/LEM/Fermentación en medio sólido info:eu-repo/classification/LEM/Biotecnología info:eu-repo/classification/LEM/Lovastatina info:eu-repo/classification/cti/6 |
| Sumario: | El hipercolesterolemico lovastatina se produce en forma convencional por fermentación líquida por Aspergillus terreus, aunque últimamente se ha utilizado la fermentación sólida (FS), un nuevo sistema que involucra un material inerte como soporte y muestra una productividad sorprendente. Una desventaja de la fermentación sólida, sin embargo, es la falta de cepas especiales, eficientes en este sistema. Por lo anterior, en esta tesis se pretende desarrollar métodos para mejoramiento genético de cepas para FS. Una estrategia avanzada para generar cepas sobreproductoras de metabolitos es el incremento del número de copias y la sobreexpresión de un gen regulador positivo. El objetivo de este trabajo fue evaluar la estrategia de incrementar el número de copias del gen lovE (gen regulador específico de los genes de biosíntesis lovastatina) y comprobar su efecto sobre la producción de lovastatina en FS y en FL. Para ello, se transformó A. terreus con el gen lovE, bajo el control de un promotor constitutivo (gpd de A. nidulans). Sin embargo, como el vector usado, pAN52.1, carece de un marcador para hongos fue necesario utilizar un proceso de cotransformación con el vector pULC43. Se obtuvieron 36 transformantes totales y como un paso de preselección, se evaluó la producción de lovastatina de las transformantes por Fermentación en Cilindro de Agar (FCA), obteniéndose que, solamente 10 incrementaban la producción con respecto a la parental, mientras que el control (transformada solamente con los vectores pULC43 y pAN52.1 pero sin el inserto lovE) mantuvo una producción ligeramente inferior a la de la parental. Así, se caracterizó a las 10 transformantes preseleccionadas en FCA, midiendo su producción en FS y FL al séptimo día. En FS solamente dos transformantes, de las 10 evaluadas, fueron sobreproductoras. La T11 mostró un incremento de producción de lovastatina de 60.48 %, llegando a una producción de 23.27 mg de lovastatina/gms. Y siguió la T08, con incremento de 37.17% (19.89 mg/gms). |
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