Construcción de vectores para la generación de cepas knockdown y sobreexpresantes con proteinas etiquetadas en el hongo filamentoso Trichoderma atroviride.
"El hongo filamentoso Trichoderma atroviride es utilizado como agente de biocontrol debido a que induce la resistencia sistémica a patógenos en plantas, produce antibióticos y enzimas líticas. Adicionalmente, este hongo se utiliza como modelo fotomorfogénico debido a que conidia en respuesta a...
| Autor: | |
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| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2013 |
| País: | México |
| Institución: | Instituto Potosino de Investigación Científica y Tecnológica |
| Repositorio: | Repositorio Institucional del IPICYT |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:ipicyt.repositorioinstitucional.mx:1010/658 |
| Acceso en línea: | http://ipicyt.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1010/176 http://ipicyt.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1010/658 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | info:eu-repo/classification/Autor/Conidiación info:eu-repo/classification/Autor/Pqa-2 info:eu-repo/classification/Autor/Vectores info:eu-repo/classification/Autor/Trichoderma info:eu-repo/classification/cti/2 info:eu-repo/classification/cti/24 info:eu-repo/classification/cti/2415 |
| Sumario: | "El hongo filamentoso Trichoderma atroviride es utilizado como agente de biocontrol debido a que induce la resistencia sistémica a patógenos en plantas, produce antibióticos y enzimas líticas. Adicionalmente, este hongo se utiliza como modelo fotomorfogénico debido a que conidia en respuesta a un pulso de luz azul. Las proteínas BLR-1, BLR-2 y TGF-1 juegan papeles muy importantes en la respuesta a la luz azul. A pesar de la importancia de éste hongo en la ciencia básica y la aplicada, los estudios a nivel molecular han sido limitados debido a la carencia de herramientas moleculares para su estudio. En el presente trabajo generamos vectores para el reemplazo de genes esenciales o que provoquen fenotipos aberrantes en T. atroviride. Los vectores portan el promotor inducible Pqa-2 del hongo Neurospora crassa (que responde a la presencia del ácido quínico en el medio de cultivo), el terminador TtrpC del hongo Aspergillus nidulans, el marcador de selección hph y las etiquetas FLAG o c-Myc para la obtención de proteínas etiquetadas en sus extremos amino o carboxilo. Los genes blr-2 y tgf-1, fueron clonados en algunas de las cuatro variantes de los vectores, las cuales fueron utilizadas para transformar a T. atroviride, obteniendo un set de cepas portadoras del gen blr-2 o cepas co-transformadas con los genes blr-2 y tgf-1. El análisis de las transformantes mostró fenotipos de hiperconidiación. La conidiación se potenció conforme se incrementó la concentración del inductor en el medio de cultivo, lo que sugirió la posible inducción de la actividad del Pqa-2 modulando la expresión del gen blr-2 o de los genes blr-2 y tgf-1. Estos indican fuertemente que los vectores generados son funcionales en T. atroviride y muy probablemente lo sean en otros hongos filamentosos." |
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