Efecto de la vitrificación en la fertilización y desarrollo embrionario in vitro de ovocitos inmaduros porcinos

Introducción: La mayoría de los estudios cuyo objetivo es evaluar las tasas de recuperación y desarrollo post-vitrificación de ovocitos porcinos han reportado mejores tasas cuando estos son criopreservados en estados embrionarios, pero no así en ovocitos inmaduros. Por esta razón, para mejorar los p...

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Detalles Bibliográficos
Autor: MIRIAM FAHIEL CASILLAS AVALOS
Tipo de recurso: tesis doctoral
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2018
País:México
Institución:Universidad Autónoma Metropolitana
Repositorio:Repositorio Institucional de la UAM Iztapalapa
Idioma:español
OAI Identifier:oai:bindani.izt.uam.mx:8623hx80d
Acceso en línea:https://doi.org/10.24275/uami.8623hx80d
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:info:eu-repo/classification/LEM/Fertilización in vitro
info:eu-repo/classification/LEM/Cerdos
info:eu-repo/classification/LEM/Reproducción animal
info:eu-repo/classification/LEM/Swine
info:eu-repo/classification/LEM/Vitrification
info:eu-repo/classification/LEM/Animal breeding
info:eu-repo/classification/cti/3
Descripción
Sumario:Introducción: La mayoría de los estudios cuyo objetivo es evaluar las tasas de recuperación y desarrollo post-vitrificación de ovocitos porcinos han reportado mejores tasas cuando estos son criopreservados en estados embrionarios, pero no así en ovocitos inmaduros. Por esta razón, para mejorar los protocolos de la vitrificación de ovocitos inmaduros, se ha evaluado el uso de diferentes tipos y concentraciones de crioprotectores, recipientes, y tiempos de incubación, pero muy pocos han evaluado cual técnica de fertilización permite incrementar las tasas de producción de blastocistos en ovocitos vitrificados. El objetivo de esta tesis fue evaluar el desarrollo embrionario hasta el estado de blastocisto a partir de ovocitos inmaduros vitrificados madurados con un sistema de co-cultivo con células de la granulosa y fertilizados por fertilización in vitro (FIV), inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) e inyección fisiológica intracitoplasmática de espermatozoides (PICSI). Así como, evaluar si la selección espermática con ácido hialurónico (AH) o con polivinilpirrolidona (PVP) antes de la inyección intracitoplasmática participan en forma importante en el incremento de las tasas de fertilización y producción de blastocistos. Resultados: Los espermatozoides seleccionados con AH-PICSI mostraron un mayor porcentaje de espermatozoides vivos/reaccionados en comparación con el control y los expuestos a la PVP. Altas tasas de espermatozoides muertos/reaccionados se obtuvieron después de la exposición a la PVP en comparación con el control y el AH. En ovocitos, la viabilidad disminuyó significativamente en el control de ovocitos denudados (DO) y en ovocitos vitrificados. Además, la maduración disminuyó significativamente en el control DO. En cuanto a los parámetros de fertilización, la FIV mostró mayores porcentajes de monospermia en comparación con la ICSI y la PICSI. Sin embargo, los resultados demostraron que la fertilización con PICSI incrementó la formación de blastocistos en los grupos control complejo ovocito-células del cúmulo (COCs), control ovocitos denudados co-cultivados con células de la granulosa (DO-GC) y ovocitos vitrificados en comparación con la FIV e ICSI. Conclusión: Para lograr altas tasas de formación de blastocitos a partir de ovocitos vitrificados en etapa de vesícula germinal (VG), se recomienda que el espermatozoide se seleccione antes de ser inyectado al ovocito con AH en lugar de la PVP, debido a que se obtienen mayores tasas de viabilidad y reacción acrosomal. Además, la fertilización por PICSI es el mejor método para producir mayores tasas de blastocistos en comparación con los procedimientos de FIV e ICSI.