Dehydrin-dehydrin interactions: evidence of homo and heterodimeric associations among acidic and basic dehydrins from Cactus pear and Arabidopsis
"Las dehidrinas (DHNs) son proteínas específicas de plantas que pertenecen al grupo 2 de las LEA (Late Embriogenesis Abundant proteins), una familia grande de proteínas desordenadas, altamente hidrofílicas, que se acumulan durante las últimas etapas de la embriogénesis y en respuesta al estrés....
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2017 |
| País: | México |
| Institución: | Instituto Potosino de Investigación Científica y Tecnológica |
| Repositorio: | Repositorio Institucional del IPICYT |
| OAI Identifier: | oai:ipicyt.repositorioinstitucional.mx:1010/1622 |
| Acceso en línea: | http://ipicyt.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1010/1622 |
| Access Level: | acceso embargado |
| Palabra clave: | info:eu-repo/classification/Autor/Arabidopsis thaliana info:eu-repo/classification/Autor/Opuntia streptacantha info:eu-repo/classification/Autor/Dehydrins info:eu-repo/classification/Autor/Dimerization info:eu-repo/classification/Autor/Sub cellular localization info:eu-repo/classification/cti/2 info:eu-repo/classification/cti/24 info:eu-repo/classification/cti/2415 |
| Sumario: | "Las dehidrinas (DHNs) son proteínas específicas de plantas que pertenecen al grupo 2 de las LEA (Late Embriogenesis Abundant proteins), una familia grande de proteínas desordenadas, altamente hidrofílicas, que se acumulan durante las últimas etapas de la embriogénesis y en respuesta al estrés. A pesar de la importancia de estas proteínas en la respuesta al estrés, su mecanismo de acción molecular aún es desconocido. Se requieren estudios in vivo para esclarecer los mecanismos de acción de estas proteínas. Previamente, en nuestro laboratorio se aisló una DHN de nopal (OpsDHN1) a partir de una biblioteca de cDNA. Posteriormente se demostró que líneas transgénicas de Arabidopsis thaliana que expresan la OpsDHN1 son tolerantes a congelamiento. En el presente trabajo se realizó una caracterización bioquímica de la proteína OpsDHN1, en donde se determinó el estado desordenado de esta DHN y se estableció su actividad crioprotectora in vitro. Además, se reportó la formación de homodímeros de la OpsDHN1 utilizando el sistema de dos híbridos "split-ubiquitin" en levadura (Y2H) y cromatografía de exclusión de tamaño (SEC). La homodimerización fue confirmada in planta mediante complementación bimolecular de Fluorescencia (BiFC). Nuestros resultados revelaron la formación de dímeros in situ con una localización dual citoplasmática/nuclear, en células de tabaco. Además, se demostró que la ausencia del motivo rico en histidina y el segmento S excluyen a la proteína OpsDHN1 del núcleo de las células vegetales. Finalmente, proporcionamos pruebas sólidas de que la interacción DHN/DHN no es exclusiva de la OpsDHN1. Nosotros demostramos la homo- y heterodimerización entre tres DHNs de A. thaliana RAB18, COR47 y ERD10, y a su vez con su ortólogo en O. streptacantha la OpsDHN1. Estos datos constituyen el primer reporte in vivo de la interacción entre DHNs dirigiendo el campo de la investigación DHNs hacia un nuevo escenario en donde las asociaciones entre estas proteínas pudieran ser exploradas como parte de su mecanismo de acción molecular." |
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