Criopreservación de esperma del abulón rojo Haliotis rufrescens
El cultivo de abulón en Baja California, México es una industria floreciente que requiere de tecnologías de apoyo para un rápido desarrollo. La criopreservación de esperma ofrece una alternativa, no sólo a la acuicultura, sino también a la problemática de conservación de especies amenazadas o en pel...
| Autor: | |
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| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2003 |
| País: | México |
| Institución: | Centro de Investigación Científica y de Educación Superior de Ensenada |
| Repositorio: | Repositorio Institucional CICESE |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:cicese.repositorioinstitucional.mx:1007/2677 |
| Acceso en línea: | http://cicese.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1007/2677 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | info:eu-repo/classification/Autor/Abulón rojo,Esperma de abulón,Ciencias del mar info:eu-repo/classification/cti/2 info:eu-repo/classification/cti/24 info:eu-repo/classification/cti/2414 |
| Sumario: | El cultivo de abulón en Baja California, México es una industria floreciente que requiere de tecnologías de apoyo para un rápido desarrollo. La criopreservación de esperma ofrece una alternativa, no sólo a la acuicultura, sino también a la problemática de conservación de especies amenazadas o en peligro de extinción. En el presente trabajo se desarrollaron protocolos para el almacenamiento a corto plazo y de criopreservación de esperma del abulón rojo Haliotis rufescens. El esperma de abulón se activa al entrar en contacto con el medio acuático. Debido a que en otras especies uno de los factores que es el responsable de la activación del esperma es la acidez o alcalinidad del medio en que ocurra el desove, fue necesario realizar ensayos para determinar si soluciones con diferente pH podían desactivar el esperma de abulón. Se refrigeraron muestras de esperma fresco en soluciones con diferente pH durante una semana. Se verificó la motilidad diariamente antes de resuspender las muestras en agua de mar filtrada. Se encontraron diferencias significativas con respecto al tiempo de almacenamiento. La máxima motilidad, respecto al control, fue encontrada el día 1 para el esperma suspendido en agua de mar con pH 6 (88%) después de haber sido resuspendido. Sin embargo, no fue posible encontrar una solución desactivadora, por lo que no se considera que el pH sea el factor activador del esperma de abulón rojo. El esperma de abulón rojo puede mantenerse móvil bajo refrigeración y concentrado en un pequeño volumen de agua de mar filtrada. Las sustancias crioprotectantes tienen un efecto tóxico en las células, por lo que este efecto tóxico agudo se determinó al suspender esperma fresco en soluciones de dimetil sulfóxido (DMSO), propilen glicol (PG) y glicerol (Gly) en concentraciones de 5, 10, 15, y 20% durante tiempos de equilibrio de 5, 10, 15, 20, 25, y 30 min. Se observó una motilidad máxima de 88% ± 0.58 utilizando DMSO 5% durante 5 min. Asimismo, se observó una tendencia a la disminución en la motilidad al aumentar la concentración de crioprotectante y tiempo de equilibrio para el esperma suspendido en las tres soluciones. Se observaron diferencias significativas entre crioprotectantes, concentraciones y tiempos de equilibrio (P< 0.05). Específicamente, para los casos del DMSO y Gly, no se encontraron diferencias significativas entre las concentraciones de 5% y 10% para el esperma incubado por 5 y 10 minutos. Tampoco se encontraron diferencias significativas entre la motilidad del esperma suspendido en Gly 5% a lo largo del tiempo (P > 0.05). No obstante lo anterior, se consideró que las soluciones crioprotectantes más adecuadas para la criopreservación de esperma de abulón rojo son DMSO 10% y Gly 10%. La criopreservación de muestras se llevó a cabo en cámaras de congelamiento del método simplificado (MS), programado (CP) y comercial (GNX). Se utilizaron tres parámetros para evaluar la viabilidad del esperma criopreservado: motilidad, viabilidad de acuerdo a células teñidas con SYBR 14® y yoduro de propidio y analizadas por citometría de flujo, y la tasa de fertilización. La mayor motilidad observada (48 ± 7%) correspondió a las muestras congeladas utilizando Gly 10% en la cámara de congelación MS, mientras que la máxima viabilidad de células espermáticas analizadas en el citómetro de flujo fue observada para las muestras congeladas en GNX (48 ± 2%), utilizando 10% DMSO. En cuanto a la tasa de fertilización, se observó una tasa máxima para muestras congeladas en GNX (29 ± 10%), utilizando Gly 10%. |
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