Caracterización molecular y funcional de genes que codifican proteínas de choque térmico (OpsHSP18, AtDjA2 y AtDjA3) de plantas bajo estrés abiótico
"El estrés abiótico es la principal causa de pérdidas de cultivos en el mundo. Sin embargo, las plantas han desarrollado mecanismos que les permiten detectar, responder y tolerar a múltiples estreses. Uno de los principales mecanismos de tolerancia al estrés en plantas, es la síntesis de proteí...
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2014 |
| País: | México |
| Institución: | Instituto Potosino de Investigación Científica y Tecnológica |
| Repositorio: | Repositorio Institucional del IPICYT |
| OAI Identifier: | oai:ipicyt.repositorioinstitucional.mx:1010/1511 |
| Acceso en línea: | http://ipicyt.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1010/1511 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | info:eu-repo/classification/Autor/Arabidopsis thaliana info:eu-repo/classification/Autor/Estrés abiótico info:eu-repo/classification/Autor/HSP info:eu-repo/classification/Autor/Proteínas J y OpsHSP18 info:eu-repo/classification/cti/2 info:eu-repo/classification/cti/24 info:eu-repo/classification/cti/2415 |
| Sumario: | "El estrés abiótico es la principal causa de pérdidas de cultivos en el mundo. Sin embargo, las plantas han desarrollado mecanismos que les permiten detectar, responder y tolerar a múltiples estreses. Uno de los principales mecanismos de tolerancia al estrés en plantas, es la síntesis de proteínas de choque térmico (HSP). En este trabajo se llevó a cabo la caracterización funcional del gen OpsHSP18 de nopal (Opuntia streptacantha) que codifica una HSP de bajo peso molecular (sHSP), el cual se aisló de una biblioteca de cDNA de nopal. Líneas transgénicas de Arabidopsis thaliana que sobreexpresan el gen OpsHSP18 mostraron un mayor porcentaje de germinación bajo estrés salino (NaCl) y osmótico (glucosa y manitol) y bajo la aplicación de ABA, en comparación con la WT (Col-0). Asimismo, en ensayos de tolerancia al estrés por la aplicación de NaCl o glucosa, las líneas 35S::OpsHSP18, mostraron un aumento en el porcentaje de supervivencia con respecto a Col-0. Por otro lado, en esta tesis nos enfocamos a estudiar los genes AtDjA2 y AtDjA3 de Arabidopsis que codifican para proteínas J (HSP40). Para su caracterización se obtuvieron líneas mutantes de T-DNA y se generaron líneas sobreexpresantes para ambos genes. Respecto al gen AtDjA3, se han reportado dos transcritos: el AtDjA3.1 (343 aa) y AtDjA3.2 (420 aa). La línea mutante del gen AtDjA3 mostró un fenotipo de sensibilidad a estrés salino, osmótico y tratamientos de ABA, mientras que las líneas que sobreexpresan la versión AtDjA3.2, mostraron una mayor tasa de germinación, mayor desarrollo de los cotiledones y peso fresco de las plántulas sometidas a estrés. También generamos líneas sobreexpresantes de la versión AtDJA3.1 de Arabidopsis, para su posterior análisis. En lo que respecta al gen AtDjA2, la línea mutante (j2) mostró un retraso en la germinación bajo los tratamientos de glucosa y ABA, caso contrario a lo observado en las líneas transgénicas. Este comportamiento fue también observado en el desarrollo de los cotiledones bajo la aplicación de NaCl y glucosa. Por último, con la finalidad de identificar proteínas blanco y/o interactores de las proteínas HSP, se construyeron vectores anzuelo para levadura pDHB1/OpsHSP18 y pDHB1/AtDJA2, que se utilizarán en el sistema de dos híbridos “Split ubiquitin”. Los resultados indican que ambas chaperonas de la familia HSP están involucradas en la respuesta al estrés abiótico, y una posible relación de las proteínas HSP con la ruta de señalización de ABA." |
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