Eliminación de levaduras resistentes a fármacos combinando terapias químicas e inactivación fotodinámica
La terapia fotodinámica (TFD) hace uso de luz apropiada que en combinación con un fotosensibilizador produce especies reactivas de oxígeno (ROS). Las ROS inducen muerte celular y principalmente por esta razón se ha estudiado la TFD como tratamiento antimicrobiano, demostrando ser eficiente inactivan...
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| Tipo de recurso: | tesis de maestría |
| Estado: | Versión aceptada para publicación |
| Fecha de publicación: | 2020 |
| País: | México |
| Institución: | Instituto Nacional de Astrofísica, Óptica y Electrónica |
| Repositorio: | Repositorio Institucional del INAOE |
| Idioma: | español |
| OAI Identifier: | oai:inaoe.repositorioinstitucional.mx:1009/1961 |
| Acceso en línea: | http://inaoe.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1009/1961 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | info:eu-repo/classification/Inspec/Photodynamic therapy info:eu-repo/classification/Inspec/Candida albicans info:eu-repo/classification/Inspec/Fluconazol resistance info:eu-repo/classification/Inspec/Methylene blue info:eu-repo/classification/Inspec/Dynamic speckle info:eu-repo/classification/cti/1 info:eu-repo/classification/cti/22 info:eu-repo/classification/cti/2209 |
| Sumario: | La terapia fotodinámica (TFD) hace uso de luz apropiada que en combinación con un fotosensibilizador produce especies reactivas de oxígeno (ROS). Las ROS inducen muerte celular y principalmente por esta razón se ha estudiado la TFD como tratamiento antimicrobiano, demostrando ser eficiente inactivando diversos microorganismos. Esta tesis tiene por objetivo demostrar el potencial de la terapia fotodinámica (TFD) sola y en combinación con tratamientos tradicionales para la eliminación de levaduras patógenas oportunistas y evaluar sus efectos por medio de análisis de la dinámica de Speckle. Los experimentos realizados se llevaron a cabo con hongos de género Candida: C. albicans y C. tropicalis. De un total de cuatro cepas, dos de ellas son aisladas de pacientes y las dos restantes son cepas tipo de laboratorio. Para la terapia fotodinámica se usó el fotosensibilizador azul de metileno AM (Meyer, México) a las concentraciones de 5 y 10 , se irradió con una fluencia de 30 J/cm² y 50 J/cm² por medio de una fuente LED (630 nm,20 mW). Los tratamientos con antifúngico se realizaron con fluconazol (Afungi, Altia) a las concentraciones de 10, 20, 40, y 40 /. Los tratamientos para TFD o fluconazol, por sí solos, mostraron que las dosis propuestas no eran letales, sin embargo, se encuentra que el mejor tratamiento combinado es 50 J/cm², 10 AM y 40 / de fluconazol, inactiva el 100 % de las unidades formadoras de colonia de C. albicans y 94.6 % de C. tropicalis, ambos resultados superiores a los tratamientos por sí solos. Se elaboraron dos matrices; una correspondiente a la viabilidad resultado de todos los tratamientos propuestos y una segunda matriz con el incremento en la eficiencia de inhibición que producen los tratamientos combinados. Posteriormente se seleccionó la cepa de C. tropicalis 443-05ct para analizar efectos de los tratamientos propuestos en colonias sobrevivientes. Para esto se analizó la dinámica de Speckle de la colonia, la cual se obtuvo a partir de paquetes de imágenes adquiridas en un arreglo experimental de Laser Speckle por transiluminación y epiluminación con la finalidad de comparar y conocer que configuración experimental era más eficiente para observar dinámica microbiana. El arreglo experimental estuvo compuesto principalmente por un láser He-Ne (Melles Griot, 633 nm, 20 mW), una lente Sigma 180 mm F2.8 y una cámara CMOS (Basler acA2040-55mum-Basler). |
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