Formación de callo e inducción de un cultivo de células en suspensión en Lophophora williamsii

Lophophora williamsii, planta suculenta de la familia Cactaceae y comúnmente llamada “peyote”, tiene importancia antropológica (etnohistórica) como recurso botánico fundamental de cohesión, de distintos y numerosos grupos indígenas de México y los Estados Unidos de América. Dentro de la práctica exp...

Descripción completa

Detalles Bibliográficos
Autor: Radaid Saúl Esparza Isunza
Tipo de recurso: tesis de maestría
Estado:Versión publicada
Fecha de publicación:2004
País:México
Institución:Universidad Autónoma Metropolitana
Repositorio:Repositorio Institucional de la UAM Iztapalapa
Idioma:español
OAI Identifier:oai:bindani.izt.uam.mx:b5644s14n
Acceso en línea:https://doi.org/10.24275/uami.b5644s14n
Access Level:acceso abierto
Palabra clave:info:eu-repo/classification/LEM/Succulent plants
info:eu-repo/classification/LEM/Plantas suculentas
info:eu-repo/classification/LEM/Cactus
info:eu-repo/classification/LEM/Peyote
info:eu-repo/classification/cti/2
Descripción
Sumario:Lophophora williamsii, planta suculenta de la familia Cactaceae y comúnmente llamada “peyote”, tiene importancia antropológica (etnohistórica) como recurso botánico fundamental de cohesión, de distintos y numerosos grupos indígenas de México y los Estados Unidos de América. Dentro de la práctica experimental y clínica de la siquiatría, el uso de la mescalina (principal sicotrópico del peyote) a sido importante en el estudio general de las sicosis, y en el tratamiento particular de la esquizofrenia. El empleo de cultivos in vitro para la propagación de plantas, y la posible producción de metabolitos secundarios en esta especie, se constituyen en la alternativa experimental de este trabajo, cuyo objetivo fundamental es el estudio del establecimiento del cultivo de células en suspensión de la especie. De cultivos de callo preexistentes, inducidos de botones o coronas de peyote, y mantenidos en medio MS con 5 mg/ L del fitorregulador 2-ip que induce la producción de brotes, se indujeron y mantuvieron temporalmente suspensiones celulares de la especie. La escasa friabilidad y gran resistencia del material calloso, motivó la decisión de implementar y desarrollar técnicas de fragmentación del material vegetal, cuya aplicación provocó inicialmente serios problemas de oxidación y turbidez; estos se resolvieron de manera eventual, con la duplicación de la concentración del recurso carbono y de antioxidantes (60 g / L de sacarosa + 200 y100 mg/ L de ácido cítrico y ascórbico, respectivamente), y posteriormente de forma definitiva, con el uso del tratamiento enzimático (celulasa + macerozima) con filtrado de malla y la utilización del homogenizador. Estas técnicas lograron uniformizar el tamaño del agregado celular, estabilizando adecuadamente la suspensión y además, reduciendo la concentración de sacarosa en 40% y la de antioxidantes a su valor base. En conclusión, se lograron en lo general condiciones estables, que permiten el establecimiento permanente de la suspensión, gracias a una progresiva eficiencia en las técnicas de fragmentado del material calloso. Por lo que respecta al comportamiento de la cinética de crecimiento de la suspensión, inicialmente el cultivo se mantuvo con el medio y el fitorregulador idénticos al del crecimiento del callo (medio MS Sigma 5519 + 2-ip como RCV); el promedio de las mediciones de peso fresco y seco se mantuvieron relativamente constantes con el transcurso del tiempo, evidenciando un crecimiento de biomasa muy lento. Con el propósito de inducir un crecimiento conspicuo del material vegetal, se agregó la auxina 2,4-D en una relación auxina /citosina de 2.5; sin embargo, la medida no prosperó, pues el índice de crecimiento para esta suspensión que es inicialmente de 9 % se reduce después al 5%, situando sus parámetros cinéticos todavía muy lejos de un crecimiento abundante y sostenido, tal como lo revela su baja tasa de división celular, caracterizada con una velocidad específica de crecimiento muy lenta (µ = 5.4 x 10-3 días-1 ) y, por lo tanto, de un tiempo de duplicación muy grande (td = 124.8 días). Resumiendo, la cinética de crecimiento de la suspensión muestra que bajo estos parámetros experimentales su crecimiento no es permanente.