Expresión del gen estructural e inductor de la bacteriocina producida por Enterococcus faecium y su efecto en la variación de la actividad antimicrobiana
Las bacteriocinas son péptidos con actividad antimicrobiana. Entre los microorganismos productores de bacteriocinas, las bacterias ácido lácticas (BAL) han sido ampliamente estudiadas, destacando la nisina, las pediocinas y enterocinas, entre otras. Dentro del grupo de las enterocinas, la enterocina...
| Author: | |
|---|---|
| Format: | master thesis |
| Status: | Published version |
| Publication Date: | 2015 |
| Country: | México |
| Institution: | Universidad Autónoma Metropolitana |
| Repository: | Repositorio Institucional de la UAM Iztapalapa |
| Language: | Spanish |
| OAI Identifier: | oai:bindani.izt.uam.mx:zk51vh138 |
| Online Access: | https://doi.org/10.24275/uami.zk51vh138 |
| Access Level: | Open access |
| Keyword: | info:eu-repo/classification/LEM/Bacteriocins info:eu-repo/classification/LEM/Bacterias lácticas info:eu-repo/classification/LEM/Bacteriocinas info:eu-repo/classification/LEM/Lactic acid bacteria info:eu-repo/classification/cti/6 |
| Summary: | Las bacteriocinas son péptidos con actividad antimicrobiana. Entre los microorganismos productores de bacteriocinas, las bacterias ácido lácticas (BAL) han sido ampliamente estudiadas, destacando la nisina, las pediocinas y enterocinas, entre otras. Dentro del grupo de las enterocinas, la enterocina A es producida por Enterococcus faecium y se caracteriza por presentar inhibición contra Listeria monocytogenes, además su regulación está mediada por sistemas de transducción de señales. Los factores que activan estos sistemas incluyen la presencia de otra bacteria competidora o algún tipo de estrés, como pueden ser: la acidificación, adición de NaCl, etanol y peróxido de hidrógeno, entre otros. El objetivo de este trabajo fue evaluar la correlación de la variación en la actividad antimicrobiana y la expresión génica del inductor y gen estructural de la enterocina A por medio de PCR en tiempo real. Para cumplir el objetivo de este trabajo, se incubaron las cepas a 35°C en medio CGB con adición de cloruro de sodio (1-6%), etanol (1-6%) y peróxido de hidrógeno (0.5-5 mM), tomando como control un cultivo sin adición de alguna sustancia. Se obtuvieron extractos crudos de cada uno de los cultivos a las 8, 16 y 24 h, los cuales se sometieron a la técnica de difusión en agar y se determinó la concentración de proteína total por el método de Bradford, reportando la actividad antimicrobiana como mm del halo de inhibición/mg prot., observando variación en la actividad de la cepa UAMI-3, mientras que la cepa MXVK29 no presentó actividad antimicrobiana en las condiciones de estrés evaluadas. Al realizar las amplificaciones de los genes a cuantificar (entA, entF), la cepa UAMI-3 no amplificó para el gen entA, es decir, la proteína causante de la actividad inhibitoria no es la enterocina A, sin embargo, se observó el estímulo causado por el estrés aplicado. La cuantificación relativa por PCR en tiempo real se llevó a cabo para la cepa MXVK29 a diferentes tiempos de cultivo (8, 12, 16, 18, 20 y 24 h) observando un máximo de expresión de ambos genes a las 24 h, lo que concuerda con el máximo determinado de actividad antibacteriana por la técnica de difusión en agar, con una tendencia de expresión promedio de 7:1 (entF: entA). Palabras clave: BAL, bacteriocinas, Enterococcus faecium |
|---|