Control of the activity of the human mitochondrial transcription termination factor (mTERF) by polymerization. First evidences
El factor de terminación de la transcripción humano (mTERF) es una proteína codificada en el genoma nuclear, de 39 kDa, que reconoce una región de 28 pares de bases en el gen del tRNALeu(UUR) mitocondrial inmediatamente adyacente al gen del rRNA 16S. La unión de mTERF a esta región provoca terminaci...
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| Tipo de recurso: | tesis doctoral |
| Estado: | Versión publicada |
| Fecha de publicación: | 2003 |
| País: | España |
| Institución: | CBUC, CESCA |
| Repositorio: | TDR. Tesis Doctorales en Red |
| OAI Identifier: | oai:www.tdx.cat:10803/3489 |
| Acceso en línea: | http://www.tdx.cat/TDX-1204103-171205 http://hdl.handle.net/10803/3489 |
| Access Level: | acceso abierto |
| Palabra clave: | Mitochondria mtDNA transcription mTERF Ciències Experimentals 577 |
| Sumario: | El factor de terminación de la transcripción humano (mTERF) es una proteína codificada en el genoma nuclear, de 39 kDa, que reconoce una región de 28 pares de bases en el gen del tRNALeu(UUR) mitocondrial inmediatamente adyacente al gen del rRNA 16S. La unión de mTERF a esta región provoca terminación de la transcripción, de modo que esta proteína se considera un factor fundamental en el control de la síntesis de RNAs ribosómicos mitocondriales. A pesar de que el mTERF se une a DNA en forma monomérica, la presencia en su secuencia de tres zippers de leucina nos llevó a explorar la posibilidad de que mTERF establezca interacciones intermoleculares. Cuando un lisado mitocondrial de células HeLa fue sometido a cromatografía de gel filtración, mTERF eluyó en dos picos, detectados por Western blotting. El primer pico eluyó con un peso molecular compatible con la forma monomérica (41 +/- 2 kDa) y las fracciones de gel filtración que lo contenían mostraban capacidad de unión a DNA, tal como se demostró por experimentos de band-shift, Western blotting y cromatografía de heparina, así como actividad de terminación de la transcripción. El segundo pico eluyó con un peso molecular estimado de 111 +/- 5 kDa, y no presentaba capacidad de unión a DNA. Así pues, proponemos que mTERF existe en dos formas, un monómero activo y un polimero inactivo. El peso molecular estimado de la forma polimerica y el hecho de que mTERF purificado de células HeLa eluye de una columna de gel filtración con un peso molecular idéntico al polimero descrito sugiere que el polímero de mTERF es un homotrímero. |
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